參與細胞的代謝活動,。此外,,通過提供鈉,,K+和Ca2+,幫助細胞調(diào)節(jié)細胞膜功能,。Na+是細胞外液中**主要的陽離子,,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用,還與Cl-共同參與生物電活動,、維持水平衡和酸堿平衡等,。K+主要分布在細胞內(nèi)液,對于***某些酶是必需的,,并在調(diào)節(jié)細胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義,。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導、能量代謝,、脂肪酸合成,、核糖體穩(wěn)定和蛋白質(zhì)合成等多種生理作用。PO43-,、SO42-,、HCO3-是基質(zhì)所需陰離子,同時是細胞內(nèi)電荷的調(diào)節(jié)者,。磷對于細胞的生長,、代謝和調(diào)控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸,、磷脂,、蛋白質(zhì)是構成細胞的主要成分,ATP,、ADP是能量生成,、存儲和利用的不可或缺的化合物。上述離子對于細胞的作用各有不同,它們共同構成了細胞賴以生存的滲透壓,、pH和電化學平衡的微環(huán)境,,細胞對于某種元素的吸收利用會受到其它元素的干擾,例如培養(yǎng)基中過高的鈣離子濃度會使鎂和鋅的吸收利用受到干擾,。因此,,在保證培養(yǎng)基中上述離子濃度滿足要求以外,還需保證上述離子之間種類和比例的平衡,。此外,,微量元素如鐵、鈷,、鎳,、硒、碘,、銅,、鋅、錳,、鉻,、鉬、氟等對于細胞生長代謝和產(chǎn)物合成都有促進作用,。使用減血清培養(yǎng)基可以減少細胞培養(yǎng)中的血清干擾因素,。北京MEM培養(yǎng)基價格
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg,、mgso4·7h2o370mg,、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg,、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg、cocl2·,、cuso4·,、na2moo4·、nafeedta37mg,、肌醇100mg,、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg,、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg,、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg,、cacl2166mg,、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·、cuso4·,、na2moo4·,、nafeedta37mg、肌醇100mg,、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg,。本發(fā)明的有益效果:1、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,,其能***應用于多種植物**培養(yǎng),,培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當或優(yōu)于ms培養(yǎng)基,可規(guī)?;茝V使用。2,、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,,其在不新增加易制爆試劑種類的情況下,去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場禁止流通的易制爆試劑nh4no3,,不*消除了培養(yǎng)基的安全**,,也便于培養(yǎng)基的購買、儲存及管理,。3,、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4,,該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當增加kno3成分來補充,,并且適當提高鉀離子含量,可促進植物發(fā)芽,,有利于維管束,、纖維**以及胚的發(fā)育。湖南減血清培養(yǎng)基代理商F12培養(yǎng)基在細胞分化和基因表達研究中有重要應用,。
平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,,BSS)簡稱鹽溶液,集緩沖液的緩沖能力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應特點于一體,,兼具維持滲透壓,、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、同時供給細胞生存所必需的能量和無機離子成分的作用,。各種BSS的緩沖系統(tǒng)有所不同,,其中以Hank’s液和Earle’s液為例,它們主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高,。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,,以維持溶液的pH值。Eagles液在空氣水平的CO2中,,溶液會變堿,,Hank’s液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存**,,需要用Earle’s液,,。如果**是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的**,,用Hank’s液就可以了,。表3-1幾種常用的平衡鹽溶液配方(g/L)一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成分,,同時參與許多重要的細胞功能活動,。但它們有使細胞凝集的作用,在配制分散細胞的消化液和特殊用途的細胞洗滌時,,宜采用Ca2+,、Mg2+含量較低的Dulbecco液或無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液,,或者PBS液,。概述基礎細胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM,、RPMI-1640,、DMEM、DMEM/F12等,。主要成分是氨基酸,、維生素、碳水化合物,、無機鹽和其它一些輔助物質(zhì),。
流加質(zhì)量百分比濃度為20%的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢ィ骷酉輨┫?。實施?一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖100g/l,,酵母浸膏25g/l,k2hpo41g/l,,mgso4·7h2o70mg/l,,2-羥基乙胺20mg/l,cecl35mg/l,,mnso4·h2o2mg/l,,feso4·7h2o2mg/l,vb15mg/l,,生物素5μg/l,;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,,121℃**15min,,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸7g/l,,尿素2g/l,殼聚糖50mg/l,;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,,自然冷卻,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng),,發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,,收集發(fā)酵液;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,,控制發(fā)酵溫度35℃,,通風比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,,溶氧維持在20%,,流加質(zhì)量百分比濃度為20%的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢ィ骷酉輨┫?。實施?一,、cecl3稀土鹽對菌體濃度,、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。DMEM培養(yǎng)基在組織工程中有重要應用,。
第三節(jié)**的代謝與培養(yǎng)基新陳代謝(metabolism)足生物有機體基本的特征之一,,是生命活動中一切生化反應的總稱。它包括物質(zhì)的分解和物質(zhì)的合成過程,。**吸收了外界的營養(yǎng),,在酶的作用下將其分解,再在酶的作用下臺成**菌體的成分,。分解與合成兩個過程伴同發(fā)生,,緊密相關,維持了**細胞的生命,,進行**的生長,。通過檢測**系統(tǒng)及代謝產(chǎn)物的生理,來鑒定**的試驗稱生化試驗,。生化試驗可分為糖代謝試驗,、蛋白質(zhì)代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種,。l.代謝試驗①氧化發(fā)酵試驗O-F,;②糖(醇)類發(fā)酵試驗;③VP和甲基紅試驗2.蛋白質(zhì)代謝試驗①蛋白水解試驗,;②硫化氫試驗,;③吲哚試驗;④脫羧酶試驗,;③脫氨試驗,;⑥尿素酶試驗。3.鹽類代謝試驗①枸櫞酸鹽試驗,;②丙二酸鹽利用試驗,;③硝酸鹽還原試驗4.呼吸酶類試驗①氧化酶試驗;②細胞色素氧化酶試驗表IMVIC試驗對腸桿菌屬的鑒別作用菌名吲哚(I)甲基紅(M)VP(Vi)枸櫞酸鹽,。MEM培養(yǎng)基含有必要的氨基酸和維生素,。吉林RPMI1640培養(yǎng)基市場報價
MEM培養(yǎng)基在藥物篩選中有重要作用。北京MEM培養(yǎng)基價格
從而提高菌株增殖速率,,但是濃度過大會導致抑菌現(xiàn)象,,后期菌株增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,,使得細胞壁疏松,提高細胞通透性,,促進谷氨酸釋放到發(fā)酵液,,從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率,。三、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l,、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,,在此基礎上,研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對菌體濃度,、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響,。對照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進行發(fā)酵,不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b,,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a,;發(fā)酵工藝參照實施例1。對照組2:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸,,其余同實施例1,。對照組3:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖,其余同實施例1,。對照組4:發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸,,其余同對照組1。實驗組為實施例1,。具體結果見表1,。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率%對照組:對照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實驗組,,各組別菌體濃度差異并不大,;對照組4在對照組1的基礎上添加了琥珀酸,對菌體濃度并沒有影響,,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒有明顯差異,,可能原因是,發(fā)酵前期以菌體增殖為主,,產(chǎn)酸較少,,琥珀酸對菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。北京MEM培養(yǎng)基價格