在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,,堿的量多時(shí),,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的,。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān),。0.1mol.L-1HAc和0.1mol.L-1NaAc組成的緩沖溶液,比0.01mol.L-1HAc和0.01mol.L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過(guò)計(jì)算便可證實(shí),。但緩沖溶液組分的濃度不能太大,,否則,不能忽視離子間的作用,。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí),,緩沖作用減小,緩沖能力降低,,當(dāng)c(鹽)/c(酸)為1∶1時(shí)△pH**小,,緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用,。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算:此時(shí)緩沖能力大,。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn),緩沖能力愈小,,甚至不能起緩沖作用,。對(duì)于任何緩沖體系,存在有效緩沖范圍,,這個(gè)范圍大致在pKaφ(或pKbφ)兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi),。弱酸及其鹽(弱酸及其共軛堿)體系pH=pKaφ±1弱堿及其鹽(弱堿及其共軛酸)體系pOH=pKbφ±1例如HAc的pKaφ為4.76,所以用HAc和NaAc適宜于配制pH為3.76~5.76的緩沖溶液,,在這個(gè)范圍內(nèi)有較大的緩沖作用,。配制pH=4.76的緩沖溶液時(shí)緩沖能力比較大,此時(shí)(c(HAc)/c(NaAc)=1,。緩沖液使用中的注意事項(xiàng),。上海PBS緩沖液一般多少錢(qián)
分析測(cè)試中,在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi),,以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,,這些條件都是通過(guò)加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的,所以緩沖溶液是分析測(cè)試中經(jīng)常需要的一種試劑,。 采用電位滴定法測(cè)定外加酸或堿對(duì)不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線,,不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對(duì)分析測(cè)試中正確選緩沖溶液的配制方法及用量具有指導(dǎo)意義。 [3]采用電位滴定法測(cè)定緩沖溶液的滴定曲線,,選擇 了常見(jiàn)的氨水-氯化銨緩沖溶液,,分別按照不同的配比得到4種緩沖溶液,實(shí)驗(yàn)測(cè)定了強(qiáng)酸,、強(qiáng)堿對(duì)緩沖 溶液的滴定曲線,,滴定結(jié)果直觀清晰,對(duì)理解緩沖容 量的概念及實(shí)踐中緩沖溶液的選擇有積極的意義,。 [3]安徽無(wú)酚紅緩沖液大概價(jià)格多少酸和鹽濃度等比例增減時(shí),,溶液的pH值不變,。
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0,。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(應(yīng)選擇與供試液pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液),,目前標(biāo)準(zhǔn)溶液有7種,在我國(guó)一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時(shí)),。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003,;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864,;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182,;0.01M。三種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置方法:1.pH4,,鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml,。2.pH7,,磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的無(wú)水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml,。3.pH9,,硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風(fēng)化),加水使溶解并稀釋至1000ml,,置聚乙烯塑料瓶中,,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸,。
磷酸鹽緩沖液取磷酸二氫鈉,,與磷酸氫二鈉。磷酸鹽緩沖液()甲液:取磷酸,,加水至1000ml,,搖勻。乙液:取磷酸氫二鈉,,加水使溶解成1000ml,。取上述甲液,搖勻,,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀100g,加水800ml,,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至,。磷酸鹽緩沖液()取,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,用水稀釋至100ml,,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉,,加水使溶解成400ml,,即得。磷酸鹽緩沖液(含胰酶)()取磷酸二氫鉀,;另取胰酶10g,,加水適量使溶解,將兩液混合后,加水稀釋至1000ml,,即得,。磷酸鹽緩沖液()取,加,,用水稀釋至1000ml,,搖勻,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,,加,用水稀釋至100ml,,即得,。磷酸鹽緩沖液()取,加新沸過(guò)的冷水稀釋至200ml,,搖勻,,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸氫二鈉,,調(diào)節(jié)pH值至,,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,,加,,用水稀釋至200ml,即得,。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,,加水使溶解成1000ml,取50ml,,加,,再加水稀釋至200ml,即得,。磷酸鹽緩沖液()甲液:取磷酸氫二鈉,,加水溶解,,并稀釋至500ml。乙液:取磷酸二氫鈉,,加水溶解,,并稀釋至100ml。取上述甲液,,搖勻,,即得。磷酸鹽緩沖液(~)取磷酸氫二鉀,。在生化研究工作中,,常常需要使用緩沖溶液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。
做ELISA確定抗原**佳包被濃度,,做方陣滴定具體怎么做呢,?選擇好一份已知為陽(yáng)性和陰性背景的標(biāo)本,將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8個(gè)條件)后加入96孔板每孔100ul,。(一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔,,**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗(yàn)選擇)4度過(guò)夜取出后甩干,加入20%NBS封閉每孔200ul,。37度2h熱封,甩去后拍干即可,。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋(倍比稀釋4個(gè)梯度)即可,。棋盤(pán)滴定就是板酶交叉,同時(shí)帶上陽(yáng)性、陰性通過(guò)試驗(yàn)確定**佳P/N的包被搭配E的試驗(yàn)2.抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行,,ELISA反應(yīng)試劑多,,其工作濃度不同對(duì)結(jié)果影響較大,因此必須對(duì)包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇,,以達(dá)到**佳的測(cè)定條件,。?1)方陣(棋盤(pán))滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。此外,PBS緩沖液也可能會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生一定的刺激性,長(zhǎng)期使用可能會(huì)導(dǎo)致皮膚老化和干燥,。河南有酚紅緩沖液進(jìn)口
試述緩沖溶液在實(shí)驗(yàn)中的作用,?上海PBS緩沖液一般多少錢(qián)
實(shí)驗(yàn)室使用緩沖液時(shí)的pH計(jì)或酸度計(jì)調(diào)校方法:1、在對(duì)緩沖液使用pH計(jì)進(jìn)行校正時(shí),,需要調(diào)整儀器的斜率,,并將電極上部的橡膠塞撥開(kāi),將小孔暴露在外,。否則,,在校正過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生負(fù)壓,導(dǎo)致溶液無(wú)法正常進(jìn)行離子交換,,從而使測(cè)量數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。2,、將電極從燒杯中取出,用濾紙將未干的水分吸干,,然后將其放入裝有混合磷酸盆的燒杯中,,等待大約15分鐘,然后進(jìn)行儀器的調(diào)整,,設(shè)定基準(zhǔn)點(diǎn),。3、然后將電極放入裝有KHC8H4O4或硼砂溶液的容器中,,等待15分鐘后,,觀察儀器顯示的pH數(shù)值。4,、校正完成后,,將橡膠塞放回原位。如果暫時(shí)不使用pH計(jì),,一定要保護(hù)好它,,將其放入保護(hù)套中,以延長(zhǎng)其壽命,。此外,,需要注意的是pH計(jì)屬于易碎品,需要輕拿輕放,。
手持式緩沖液pH計(jì)的校準(zhǔn)方法:在溫度為25度的條件下,,將測(cè)試電極插入pH值為6.86的混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中,并緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)電極,??梢陨晕⒄{(diào)整校正電位器,直到顯示器上的數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值相同,。如果將電極插入其他緩沖溶液中,,如pH值為4.01的C8H5KO4或pH為9.18的硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中,,顯示的數(shù)值與緩沖液的pH值允許有一定誤差,,但誤差應(yīng)在參考值范圍內(nèi),。 上海PBS緩沖液一般多少錢(qián)