所描述的實施例**是本申請一部分實施例,而不是全部的實施例,?;诒旧暾堉械膶嵤├绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,,都應(yīng)當屬于本發(fā)明保護的范圍。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,,mgso4·7h2o50mg/l,,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,,mnso4·h2o3mg/l,,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,,生物素7μg/l,;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,,121℃**15min,,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l,;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b,;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液,;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,,控制發(fā)酵溫度35℃,通風比1∶,,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,,溶氧維持在20%。無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細胞培養(yǎng),。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導
如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)以維持細胞的生長,,對每個培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類,、培養(yǎng)方式,、細胞種類的不同而存在差異。細胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細胞培養(yǎng)液指細胞生長的液體環(huán)境,,一般指完全培養(yǎng)液,,添加了血清、水解乳蛋白,、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液,。細胞培養(yǎng)基&血清模式血清對于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細胞系來說是需要的,因為大多數(shù)單獨的培養(yǎng)基并不能提供細胞生長所需要的全部營養(yǎng),,如MEM培養(yǎng)基,,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,,細胞的形態(tài)和功能不受影響,。細胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,,以補充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸,、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),,即成乳漢(歐)液,,再與化學合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用(如1:1)。細胞培養(yǎng)基&各類添加劑(生長因子等)模式成分復雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,,包括蛋白質(zhì),、多肽,、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物,、**酸及脂類等,。湖南無血清培養(yǎng)基一般多少錢減血清培養(yǎng)基減少了實驗中血清帶來的變異性。
培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說明中有加熱溶解后高壓**,,有的加熱沸騰后高壓**,,見過一些實驗室,不經(jīng)加熱直接高壓**,,也有的實驗室一律加熱沸騰后高壓**,。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對檢測結(jié)果有沒有影響,?品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度,,下面制備操作影響比較大的是(??)。A,、原料稱量混合溶解B,、加熱煮沸,調(diào)PH值C,、過濾,、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求助】培養(yǎng)基制備請問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎,?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法,,如配方中有特殊規(guī)定或要求,,以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方,,計算各種營養(yǎng)成分用量,。一般*品可用普通*物天平稱量,用量少的*品,,可按比例配成高濃度溶液,,再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料,,原理,、應(yīng)用、品牌,、技術(shù)對比等越詳細越好,。
文獻2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),,在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量,。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進行了改進,,通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,,一舉兩得,。技術(shù)實現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點,,繼續(xù)進行了改進,,以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進一步地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,,酵母浸膏,k2hpo4,,mgso4·7h2o,,2-羥基乙胺,cecl3,,mnso4·h2o,,feso4·7h2o,vb1,,生物素,;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,,**,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進一步地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,,尿素,殼聚糖,;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph,**,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b,。推薦地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,,k2hpo41-5g/l,。減血清培養(yǎng)基提高了實驗的可重復性。
1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,,培養(yǎng)16d的幼苗,,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高,、平均莖中粗為,,葉色濃綠,根系發(fā)達,、平均根數(shù)為8個,。如圖4所示。對比培養(yǎng)例4:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,,其余完全同培養(yǎng)實例4,,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,,培養(yǎng)16d的幼苗,,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高,、平均莖中粗為,,葉色濃綠,根系發(fā)達,、平均根數(shù)為6個,。如圖4所示。培養(yǎng)實例4和對比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100%,;在相同條件下培養(yǎng)16d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,,其莖高、莖中粗,、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基,。如圖4所示。培養(yǎng)實例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(1)擬南芥葉片愈傷**誘導培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,,用超純水溶解,,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。(2)擬南芥根愈傷**誘導培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+2,,,用超純水溶解,,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。,。無酚紅培養(yǎng)基確保了實驗結(jié)果的準確性。湖南無血清培養(yǎng)基一般多少錢
使用減血清培養(yǎng)基可以減少細胞培養(yǎng)中的血清干擾因素,。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導
本氏***葉片及根愈傷**誘導的對比效果圖,,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導率,;c:根愈傷**,;d:根愈傷**誘導率;a和c中bar=,;圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,,水稻成熟胚愈傷**誘導的對比效果圖,a:水稻成熟胚愈傷**,;b:水稻成熟胚愈傷**誘導率,;a中bar=;圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs,、ms,、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖;圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至,、ms,、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長狀況的比較效果圖,a:不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無菌苗生長情況,;b1,、c1和d1:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b2,、c2和d2:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果,;b3、c3和d3:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果,;b4,、c4和d4:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b5,、c5和d5:1/,;b6、c6和d6:1/,;b7,、c7和d7:;b8,、c8和d8:,;a,、b、c和d中bar=,;圖10是對在未調(diào)ph和將ph調(diào)至,、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a),、莖中粗(b),、根長(c)、鮮重(d)進行統(tǒng)計的比較效果圖,。具體實施方式下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步描述,。實施例一,本實施例廣適性植物**培養(yǎng)基,,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg,、。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導