微量元素在細(xì)胞內(nèi)通常以與有機(jī)物結(jié)合的形式存在,。其中鐵在細(xì)胞中參與氧的轉(zhuǎn)運(yùn)；鈷是維生素B12的組成部分,，參與葉酸的合成和脂肪酸的合成,；鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細(xì)胞內(nèi)具有重要功能的酶,，還具有穩(wěn)定核酸結(jié)構(gòu)的功能,；亞硒酸鈉中的硒，作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔基,，具有抗過氧化物能力,，參與消除細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸過氧化物，提高細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和活性,。在低血清,、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中，為滿足細(xì)胞生長(zhǎng)增殖需要,，常常添加一些成份：蛋白質(zhì),、多肽、核苷,、嘌呤,、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、脂類,、及一些血清替代因子等,。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用，動(dòng)物細(xì)胞對(duì)許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用,，如白蛋白、傳遞蛋白,、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸,、***、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白,，能夠結(jié)合鐵，促進(jìn)細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收,，并具有***作用,，其促生長(zhǎng)作用可能與其具有生長(zhǎng)因子的功能有關(guān)。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對(duì)葡萄糖和氨基酸的利用,，商業(yè)化中一些生長(zhǎng)因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中,，主要用來(lái)刺激細(xì)胞增殖，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成,。乙醇胺是一種重要的刺激細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物,，是腦磷酸的合成前提,。無(wú)血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。F12培養(yǎng)基代理商

    培養(yǎng)實(shí)例7和對(duì)比培養(yǎng)例7的誘導(dǎo)結(jié)果比較：：用上述方法進(jìn)行水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)時(shí),，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷**形態(tài)大小均相近,，出愈率均為100％。如圖7所示,。培養(yǎng)實(shí)例8：液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較：a,、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基：通常多種因素會(huì)導(dǎo)致相同超純水制水機(jī)產(chǎn)出的超純水ph變動(dòng)較大，ph通常為,。分別選取ph為,、、,、,、、,，分別配制ms液體培養(yǎng)基,、cs液體培養(yǎng)基、1/2ms液體培養(yǎng)基,、1/2cs液體培養(yǎng)基,，制作方法為：ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l。b,、結(jié)果為：用ph為,，ms液體培養(yǎng)基ph為，cs液體培養(yǎng)基ph為,，1/2ms液體培養(yǎng)基ph為,，1/2cs液體培養(yǎng)基ph為。植物**適宜生長(zhǎng)的ph一般為,，觀察可知,，ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動(dòng)較大，其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時(shí)通常需要調(diào)節(jié)ph,，過程繁瑣,，相比之下。F12培養(yǎng)基代理商減血清培養(yǎng)基減少了血清對(duì)細(xì)胞的影響,。

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件,。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，培養(yǎng)基在高溫**的過程中,，其營(yíng)養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級(jí)反應(yīng)來(lái)描述其反應(yīng)速度：式中—表示營(yíng)養(yǎng)成分破環(huán)的速率,，C：表示營(yíng)養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù),，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系,，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù),，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度,，k同樣,，**過程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2,，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2,；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過程實(shí)際上是營(yíng)養(yǎng)成分破壞,、菌體死亡的兩個(gè)平行性反應(yīng),，對(duì)于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高,，其兩個(gè)平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加,，但增加的幅度（大小）卻不同,，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實(shí)驗(yàn)證明：營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol,；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。

    7)溶液應(yīng)在2℃－8℃下避光保存,。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書,。2）配制可高壓**細(xì)胞培養(yǎng)基(1)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下,，并入容器,。加注射用水至總體積的95％，輕微攪拌溶解,。(2)在121℃,、15psi下**15分鐘。(3)待溶液冷卻至室溫,，加入無(wú)菌mol/LL－谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無(wú)菌％（w/v）碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積,，加注射用水（20℃～30℃）至規(guī)定體積,，混勻。(4)如果必要,，用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值,。(5)溶液應(yīng)在2℃－8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書,。注意事項(xiàng)1）細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水（經(jīng)石英蒸餾器蒸餾）或超純水,，醫(yī)*生產(chǎn)上一般為注射用水,。2）建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用，因?yàn)榘b一旦打開,，組分可能會(huì)變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán),。3）溶解干粉培養(yǎng)基時(shí)先加入終體積90％－95％的培養(yǎng)用水，添加劑加完后再補(bǔ)足,。4）如需添加的組分較多時(shí),，某一組分完全溶解后，再添加另一組分,。5）待培養(yǎng)基完全溶解后再加入碳酸氫鈉,，以免產(chǎn)生沉淀。6）所有成分完全溶解后,，培養(yǎng)基應(yīng)立即過濾或高壓**,，以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。7）在過濾**時(shí),。F12培養(yǎng)基適用于復(fù)雜細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),。

    這些重組蛋白和動(dòng)物來(lái)源成分對(duì)生物制品的安全性有很大影響。成本低,。主要用途應(yīng)用案例采用199(SLM),、MEM(SLM)和DMEM（SLM）低血清培養(yǎng)基分別培養(yǎng)Vero細(xì)胞、BHK21細(xì)胞和CHO細(xì)胞,，新生牛血清用量可以從10％降至3％,，減少新生牛血清使用批次和批間差的影響，減少生物制品純化損失,，減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來(lái)干擾和差異的風(fēng)險(xiǎn),，提高制品安全性。低血清培養(yǎng)基可以在方瓶,、3L轉(zhuǎn)瓶,、15L轉(zhuǎn)瓶及生物反應(yīng)器中培養(yǎng)細(xì)胞，在*苗生產(chǎn)中可以達(dá)到低血清高密度的培養(yǎng)效果,。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，易使細(xì)胞增殖迅速，代謝旺盛,，代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有不良影響,，易產(chǎn)生細(xì)胞老化脫落現(xiàn)象。因此需要適當(dāng)增加換液次數(shù),，增加傳代頻率,。獲取同樣的細(xì)胞量，用低血清培養(yǎng)基將比用傳統(tǒng)培養(yǎng)基縮短近1/3的時(shí)間,，可提高生產(chǎn)效率,。采用199(SLM)低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細(xì)胞分泌狂犬*苗病毒,，滴度明顯高于采用199培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基BHK21細(xì)胞,，在本實(shí)驗(yàn)情況下12代內(nèi)細(xì)胞形態(tài)和致密度均優(yōu)于MEM培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)情況,，因而可以預(yù)期其產(chǎn)生的口蹄*、甲肝等*苗生產(chǎn)的病毒產(chǎn)量將提高,。低血清培養(yǎng)基用于反應(yīng)器Vero細(xì)胞狂犬*苗的生產(chǎn),，實(shí)踐證明效果良好。采DMEM,。MEM培養(yǎng)基在藥物篩選中有重要作用,。河南MEM a培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)

F12培養(yǎng)基提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，支持細(xì)胞的快速增殖,。F12培養(yǎng)基代理商

    按中華******典2005年版二部附錄ⅧL干燥失重測(cè)定法進(jìn)行,。滲透壓溶劑通過半透膜由低濃度向高濃度溶液擴(kuò)散的現(xiàn)象稱為滲透，阻止?jié)B透所需施加的壓力,，稱為滲透壓,。細(xì)胞必須生活在等滲環(huán)境中，動(dòng)物細(xì)胞借助K＋,、Na＋維持滲透平衡,。大多數(shù)細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定的耐受性。但是培養(yǎng)液滲透壓過高容易使細(xì)胞脫水萎縮,，培養(yǎng)液滲透壓過低容易使細(xì)胞膨脹破裂,，因此要控制培養(yǎng)基的滲透壓范圍。按中華******典2005年版二部附錄ⅨG滲透壓摩爾濃度測(cè)定法進(jìn)行,。**內(nèi)*****內(nèi)***是許多病原性**所產(chǎn)生的***,。它的特殊性在于不是**或**的代謝產(chǎn)物，而是**死亡或解體后才釋放出來(lái)的一種具有生物活性的物質(zhì),。培養(yǎng)基**內(nèi)***過高,，對(duì)生物制品*苗（如狂犬、乙肝*苗）,、基因工程*品等注射用的*品都需要檢查**內(nèi)***,。因此本項(xiàng)目的檢驗(yàn)符合生物制品質(zhì)量控制要求。常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基的**內(nèi)***標(biāo)準(zhǔn)定為＜10EU/ml,。稱取本品規(guī)定量（見表4-12）的1/100,，加入**內(nèi)***檢查用水10mL溶解，吸取該溶液mL加**內(nèi)***檢查用水mL,，混勻即得試樣。按中華******典2005年版二部附錄ⅪE**內(nèi)***檢查法中的凝膠法進(jìn)行,。微生物限度細(xì)胞培養(yǎng)基不是無(wú)菌產(chǎn)品,，其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖,。F12培養(yǎng)基代理商