1,、細(xì)胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢,？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶,，酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,，從而使兩者分離,。這時(shí)，細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形,。圖1.胰酶酶切位點(diǎn)2,、使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞，在使用胰酶消化時(shí)發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程,，這是什么原因,？血清終止的原理其實(shí)是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,，使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會,。3、為什么使用了胰蛋白酶消化,，細(xì)胞還是成團(tuán)的,，這可能是什么原因?qū)е碌模竣傧瘯r(shí)間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細(xì)胞密度過高之后才消化傳代⑤胰酶存儲不當(dāng),，或者使用了過期胰酶含EDTA的胰酶消化活力會比不含EDTA的強(qiáng),。EDTA胰酶價(jià)格對比

    細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶生物制品簡介中文名稱:胰蛋白酶中文同義詞:胰蛋白酶;胰蛋白酶1：250（豬胰臟）;胰蛋白酶1：300（豬胰臟）;胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類英文名稱:Trypsin英文同義詞:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS號:9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS號:232-650-8胰蛋白酶物化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬,、羊的胰臟提取,，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑,。易溶于水,，不溶于三氯甲烷、乙醇,、**等有機(jī)溶劑,。在，短時(shí)間煮沸幾乎不失活,；在堿溶液中加熱則變性沉淀,，Ca2+有保護(hù)和***作用，胰蛋白酶的等電點(diǎn)為,。牛胰蛋白酶原有229個(gè)氨基酸組成,，含6對二硫鍵，其氨基酸排列順序和晶體結(jié)構(gòu)已被闡明,。在腸激酶活自身催化下,，酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解，釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽,，生成有活性的胰蛋白酶,。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個(gè)，分子量23800[2],，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶,。豬胰蛋白酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)與牛胰蛋白酶十分相似,，在氨基酸殘基排列順序中，只有41個(gè)氨基酸殘基不同,。EDTA胰酶價(jià)格對比消化使用的胰酶是含EDTA還是不含的,？

    收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶編輯鎖定本詞條由“科普**”百科科學(xué)詞條編寫與應(yīng)用工作項(xiàng)目審核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,，EC,，是從牛、羊,、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,，作為消化酶而起作用,。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后，作為胰液的成分而分泌,，受腸激酶,，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶,，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷,。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原,、羧肽酶原,、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用,。是特異性**強(qiáng)的蛋白酶,，在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中，它成為不可缺少的工具,。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin別稱胰酶化學(xué)式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登錄號9002-07-7EINECS登錄號232-650-8[1]熔點(diǎn)115℃[1]水溶性易溶外觀白色或類白色目錄1生物制品簡介?物化性質(zhì)2*典標(biāo)準(zhǔn)?來源含量?制法要求?性狀?鑒別?檢查?效價(jià)測定?制劑3胰蛋白酶的醫(yī)學(xué)檢查?檢查名稱?分類?胰蛋白酶的測定原理?試劑?操作方法?正常值?化驗(yàn)結(jié)果臨床意義?附注?相關(guān)疾病4生物*品說明?*理作用?適應(yīng)證?禁忌證?用法用量?注意事項(xiàng)?不良反應(yīng)：?**點(diǎn)評5其他,。

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶,，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷,。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng),，以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì),，使組織或細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強(qiáng),。常用胰酶工作濃度為0.25%,。EDTA可以螯合鈣鎂離子,，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解,，起到增強(qiáng)消化的效果。酚紅是一種pH指示劑,，溶液偏堿性時(shí)呈紫紅色,，偏酸性時(shí)呈橘紅色,，近中性時(shí)呈粉紅色,。本產(chǎn)品為0.25%胰蛋白酶消化液,，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s緩沖液,，不含EDTA,，無酚紅指示劑,，經(jīng)0.22μm過濾除菌,。胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

    胰蛋白酶試劑同酶速率法測定,。胰蛋白酶操作方法同酶速率法測定,。胰蛋白酶正常值（1）RIA法：陰性,。（2）酶速率法（37℃）：十二指腸液：150～600μg/ml胰蛋白酶化驗(yàn)結(jié)果臨床意義（1）升高：急性胰腺,、慢性胰腺（復(fù)發(fā)期）,、胰腺*,、腎功能不全等,。（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺后期）。胰蛋白酶附注急性胰腺時(shí)血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍,，一般在10～15天**正常。胰蛋白酶相關(guān)疾病急性胰腺,、慢性胰腺,、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品說明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶為肽鏈內(nèi)切酶,，對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用,，可使天然蛋白、變性蛋白,、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸,。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會消化正常**,，而能分解黏痰,、膿性痰等黏性分泌物，能促進(jìn)***,、化療*物向病灶滲透。胰蛋白酶適應(yīng)證1.用于膿胸、血胸,、外科癥,、潰瘍,、創(chuàng)傷性損傷,、婁管等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫、膿腫,。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。3.用于***毒蛇咬傷,，曾試用于竹葉青,、銀環(huán)蛇、眼鏡蛇,、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800余例,，均獲***。胰蛋白酶禁忌證1.肝腎出血,、出血傾向及結(jié)核性膿腫患者禁用,。2.不可用于急性癥及出血空腔中。胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn)。山東進(jìn)口胰酶常見問題

胰蛋白酶溶液作為細(xì)胞分離試劑廣泛應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng),。EDTA胰酶價(jià)格對比

在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,，貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液,。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ,，EDTA 等,。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶,，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),，破壞細(xì)胞間的連接,，從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性,、胰酶濃度,、溫度和作用時(shí)間有關(guān),，在PH 8.0和37℃時(shí)，胰酶的作用能力**強(qiáng),，因此使用胰酶時(shí),，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,，以免消化過度造成細(xì)胞損傷,。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%，而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度（0.05%）的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化,。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,，從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,，以增強(qiáng)解離效果,。EDTA胰酶價(jià)格對比