式中:N0—開始**(t=0)時原有活菌數(shù);Nt----經(jīng)時間t后殘存活菌數(shù),。k:意義同上,;t:表示理論**時間k=()logNt/N0,;比死亡速率常數(shù)K,,K值大,,表明微生物容易死亡,。理論**時間的計算需要注意以下幾個問題:(1)K值因不同的微生物種類不同,、不同的生理狀態(tài)、不同的外界環(huán)境,,差別很大,,實質(zhì)上,它是微生物熱阻的一種表示形式,,微生物的熱阻越大,,K值也越小??梢匀∧蜔嵝匝挎邨U菌的K進(jìn)行計算,。(2)在計算過程中,N0,,Nt如何取值,?N0為**開始時培養(yǎng)基中活微生物數(shù),可以參考一般培養(yǎng)基中的活微生物數(shù)為(1-2)×107個/ml,;Nt通常取,,既**失敗的概率為千分之一。(3)上述**時間,,通常稱之為理論**時間,,只可以用于工程計算中,,在實踐過程中,,因蒸汽的壓力問題(不穩(wěn)定)、蒸汽的流量問題有很大差別,甚至培養(yǎng)基中的固體顆粒的大小,、培養(yǎng)基的粘度等因素,,都會影響**效果,實際的設(shè)計和操作計算時間可作適當(dāng)比例的延長或縮短,。在實際生產(chǎn)中,,通常采用經(jīng)驗數(shù)值:間歇**,121℃,,20—30分鐘,;連續(xù)**,137℃,,15—30s,,在維持罐中保溫8—20分鐘。4,、**溫度的選擇在培養(yǎng)基**過程中,,除了雜菌死亡,還伴隨著培養(yǎng)基成分的破壞,。因此必須選擇既能達(dá)到**目的,。無血清培養(yǎng)基確保了實驗結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。浙江減血清培養(yǎng)基常見問題
培養(yǎng)實例7和對比培養(yǎng)例7的誘導(dǎo)結(jié)果比較::用上述方法進(jìn)行水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)時,,cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷**形態(tài)大小均相近,,出愈率均為100%。如圖7所示,。培養(yǎng)實例8:液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較:a,、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基:通常多種因素會導(dǎo)致相同超純水制水機(jī)產(chǎn)出的超純水ph變動較大,ph通常為,。分別選取ph為,、、,、,、、,,分別配制ms液體培養(yǎng)基,、cs液體培養(yǎng)基、1/2ms液體培養(yǎng)基,、1/2cs液體培養(yǎng)基,,制作方法為:ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,;1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,;1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,。b、結(jié)果為:用ph為,,ms液體培養(yǎng)基ph為,,cs液體培養(yǎng)基ph為,1/2ms液體培養(yǎng)基ph為,,1/2cs液體培養(yǎng)基ph為,。植物**適宜生長的ph一般為,觀察可知,,ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動較大,,其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時通常需要調(diào)節(jié)ph,過程繁瑣,,相比之下,。河北培養(yǎng)基市場報價MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。
所描述的實施例**是本申請一部分實施例,,而不是全部的實施例,。基于本申請中的實施例,,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,,都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,,mgso4·7h2o50mg/l,,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,,mnso4·h2o3mg/l,,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,,生物素7μg/l,;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,,121℃**15min,,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,,尿素2g/l,,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,,自然冷卻,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),,發(fā)酵培養(yǎng)24h,,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,,收集發(fā)酵液,;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,,通風(fēng)比1∶,,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%,。
文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量,。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),,通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,,一舉兩得,。技術(shù)實現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點(diǎn),,繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),,以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,,酵母浸膏,,k2hpo4,mgso4·7h2o,,2-羥基乙胺,,cecl3,mnso4·h2o,,feso4·7h2o,,vb1,生物素,;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph,**,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,,尿素,,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph,,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b,。推薦地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,,k2hpo41-5g/l,。F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出優(yōu)越的性能。
CD3-CD56+:50%-90%NK細(xì)胞無血清培養(yǎng)基制劑制備過程中,,需要對細(xì)胞進(jìn)行3次清洗,,在大量的實驗中會發(fā)現(xiàn),在清洗細(xì)胞的過程中往往會損失大量細(xì)胞,,少則30%多則50%,。友康研**細(xì)胞回收液干細(xì)胞溫和消化酶專門用于干細(xì)胞的消化,包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,,胚胎干細(xì)胞(ES)等。消化作用其溫和,,對細(xì)胞的干細(xì)胞溫和消化酶(500mL/瓶)T細(xì)胞無血清培養(yǎng)基可用于Car-T細(xì)胞的培養(yǎng),。培養(yǎng)時可不添加任何自體血漿。T細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于HEK293細(xì)胞的培養(yǎng)及重組蛋白的表達(dá),,HEK293蛋白表達(dá)無血清培養(yǎng)基成分明確,,比較大細(xì)胞密度可達(dá)7×10E6cells/mHEK293蛋白表達(dá)無血清培養(yǎng)基GMP級細(xì)胞凍存液不含蛋白,、不含DMSO,化學(xué)成分明確,。是可作為細(xì)胞*物*用輔料的凍存液,。GMP級細(xì)胞凍存液友康生物免*細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(CIK),用于單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng),。免*細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于懸浮HEK293細(xì)胞(如293T,、293S、293F,、293A等)的連續(xù)培養(yǎng)以及外源基因的瞬時表達(dá),,尤其在包裝慢**過程中表HEK293全懸浮無血清培養(yǎng)基CHO無血清培養(yǎng)基,,無血清,,低蛋白;采用批次培養(yǎng),,CHO比較大生長密度可達(dá)9E6cells/mL,。無酚紅培養(yǎng)基確保了實驗結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。上海減血清培養(yǎng)基哪家便宜
RPMI1640培養(yǎng)基在抗體生產(chǎn)和免疫研究中有重要作用,。浙江減血清培養(yǎng)基常見問題
附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,,哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌苗在培養(yǎng)基中生長情況,;b:無菌苗蓮座葉及根系發(fā)育,;c:萌發(fā)率;d主根長度,;a和b中bar=,;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)的對比效果圖,,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況,;b:無菌植株地上部分及根系發(fā)育;c:無菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右),;d:主根長度,;e:株高;f:蓮座葉長度,;g:成熟花粉活力,;a中bar=、b中bar=,、c中花***bar=,、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,,油菜無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況,;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高,;d:莖中粗,;e:主根長;f:大于,;a中bar=,、b中bar=;圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,,馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育,;c:莖高,;d:莖中粗;e:根數(shù),;a和b中bar=,;圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,,a:葉片愈傷**,;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**,;d:根愈傷**誘導(dǎo)率,;a和c中bar=;圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,。浙江減血清培養(yǎng)基常見問題