品名：0.25%胰蛋白酶溶液,，1X分類：細(xì)胞消化試劑規(guī)格：100ML用途：消化試劑,，如胰蛋白酶,，被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解,，以及將組織進(jìn)行游離,，以開展原代細(xì)胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶（1：250）以及一種新型非哺乳動(dòng)物豬胰蛋白酶替代品,，稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液，可以快速消化,，同時(shí)不損傷細(xì)胞,。其非哺乳動(dòng)物配方使它適用于無血清應(yīng)用，不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離,，形成單細(xì)胞懸浮物，保持高細(xì)胞活力,，并使傳代時(shí)的變異減至**小,。有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑。福建EDTA胰酶供應(yīng)商家

    使**或細(xì)胞片分散成單個(gè)細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn),。影響消化速度的因素較多，主要有胰酶溶液的活性（配制條件,、凍存或4℃保存時(shí)間長(zhǎng)短,、是否反復(fù)凍融、化凍后存放時(shí)間及溫度等）,、消化時(shí)的溫度（氣溫,、細(xì)胞培養(yǎng)瓶及胰酶溶液的溫度）以及所加胰酶溶液的多少等。加入胰蛋白酶-EDTA溶液,，視細(xì)胞瓶的大小加入體積為2ml或更多（依培養(yǎng)器皿的大小而定）,，以使充分浸潤(rùn)；一般消化時(shí)間約為1至3分鐘,，肉眼觀察瓶底由半透明（細(xì)胞單層連接成片）轉(zhuǎn)為透明,、點(diǎn)狀（出現(xiàn)細(xì)小空隙）時(shí),，棄去細(xì)胞消化液,，或看見培養(yǎng)瓶壁呈白茫狀即可。并加入適量的完全培養(yǎng)液終止消化,，吹打分散,；如見大量細(xì)胞片狀脫落，已消化過頭,，則不能頃倒消化液而直接進(jìn)行下一步操作,。（消化過頭，可造成大量細(xì)胞從瓶壁上脫下，甚至造成細(xì)胞破碎,。由于血清含有非特異性胰蛋白酶抑制劑,，所以加入完全培養(yǎng)基可以終止反應(yīng)。胰酶配置方法：1,、培養(yǎng)液配制,，方便好用，對(duì)細(xì)胞影響小,，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2,、生理鹽水配制，要先調(diào)ph值（①胰酶（1：250）克②EDTA-Na③NaCl④KCl⑤Glucose⑥PhenolRed⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時(shí),，調(diào)pH,，過濾**。）3,、pbs（：稱取胰酶粉末,。西藏進(jìn)口胰酶價(jià)格查詢胰酶在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用和在消化酶中的作用？

    一,、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需的EDTA是乙二胺四乙酸,，一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用,。原因是鈣和鎂等金屬離子會(huì)降低胰酶的活性,，因此在使用胰蛋白酶消化液時(shí)應(yīng)添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用,。二,、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需材料及試劑：PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)步驟：1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為％,，即將,。注意，盡量不要用水溶解,，因?yàn)楸仨毐３譂B透壓,。％％，可根據(jù)細(xì)胞消化的難度進(jìn)行調(diào)整,。不需要EDTA,，可以省略易于消化的細(xì)胞。EDTA對(duì)細(xì)胞粘附有影響,，因此應(yīng)大量使用,。如果影響粘附，則必須將其用于消化,，在用完全培養(yǎng)基終止消化后,，離心并棄去上清液,，然后添加完全培養(yǎng)基以進(jìn)行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,，則不要離心,。。用磷酸酶稀釋PBS,。4.請(qǐng)注意，血清可以阻止血漿酶的作用,，但不能阻止EDTA,。對(duì)于某些細(xì)胞，有必要在消化后停止離心,。5.當(dāng)pH約為8時(shí),，磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中,，您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8,。請(qǐng)注意，磷酸酶會(huì)使溶液變酸,，因此您應(yīng)隨時(shí)溶解時(shí)測(cè)量pH值,。調(diào)整。請(qǐng)注意,，不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉,，否則電池將無法承受堿的作用。

胰蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品加工,、制藥,、生化檢測(cè)和制革等多種行業(yè)。在制藥工業(yè)中,，胰蛋白酶可使天然蛋白,、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸,，以達(dá)到***的目的,。胰蛋白酶生物藥用于***呼吸道疾病，可以溶解黏痰和膿性痰,，還可以***毒蛇咬傷等,。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會(huì)消化正常組織,，而能分解膿性痰等黏性分泌物,，促進(jìn)***、化療藥物向病灶滲透,。在食品工業(yè)中,，胰蛋白酶主要用于水解價(jià)值較高的動(dòng)植物性蛋白等，以牛乳為例，利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白,、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原,，能生產(chǎn)低敏配方奶粉。在制革工業(yè)中,，胰蛋白酶用于皮革脫灰軟化,，也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的膠原蛋白。[1]細(xì)胞消化時(shí),，胰酶不去除對(duì)細(xì)胞的影響,？

0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑，下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題,。

胰酶的使用濃度是多少,？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年,。隨著時(shí)間延長(zhǎng),，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,，在使用前從-20℃冰箱取出,。盡量避免在4℃長(zhǎng)期保存。胰酶使用的時(shí)候要注意什么,？（1）在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染,。（2）胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差,。 胰酶細(xì)胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA,。西藏進(jìn)口胰酶價(jià)格查詢

胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。福建EDTA胰酶供應(yīng)商家

胰酶操作步驟：

(*供參考) ：1. 吸取培養(yǎng)基,，用無菌的PBS,、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以除去殘余的血清,。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液,，略蓋過細(xì)胞即可。根據(jù)細(xì)胞的特性可以增加或減少胰酶用量,，室溫放置30秒至2分鐘,。（不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同）3. 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮,，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀,；或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。4. 此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液,。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,，吹打下細(xì)胞,，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化,。 福建EDTA胰酶供應(yīng)商家