PBS緩沖液,,是生物化學(xué)研究中使用**為***的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4,、NaCl和KCl,,一般作為溶劑,,起溶解保護試劑的作用,。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣,,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度,。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價陽離子,。注:PBS不是磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,,PB)。配置方法:稱取8.0g NaCl,、0.2g KCl,、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液,。衡鹽溶液的主要功能使維持 pH 和滲透壓平衡,,為細胞提供水分和必需無機離子。中國澳門HBSS平衡鹽溶液哪家好
(三)Earle液一般認為Earle液比Hanks液緩沖能力強,,但Earle液在不用橡皮塞的容器中需加C02平衡(利用5%C02氣體平衡),,其配方如下:1.母液A(10×)配法NaCl68.0gKC14.0gMgS04·7H202.0gNaH2P04·H2O1.44g葡萄糖10.0g雙蒸水800ml酚磺酞(0.4%)l00ml將兩者混合即為l0×母液A(900ml),。2.母液B(l0×)配法CaC122.0g雙蒸水l00ml將母液A和B分別經(jīng)67.6kPa(115℃)15分鐘滅菌,待冷后,,無菌操作將B液徐徐倒入A液中,,并分裝,置4℃保存(稱Earle貯存液),。3.7.5%NaHCO37.5%NaHCO3液的配制是稱取NaHC0315g,溶于200ml蒸餾水中,,高壓滅菌后分裝,注意用橡皮塞封住瓶口存放,。4.使用液配制法取1份Earle貯存液加9份雙蒸水稀釋后,,塞緊瓶塞,寫明標(biāo)記,,經(jīng)67.6kPa(115℃)15分鐘滅菌,,置室溫或4℃保存?zhèn)溆谩ER用時在每l00ml的Earle使用液中加入無菌的7.5%NaHC032.9ml(也相當(dāng)于調(diào)至所需pH),。Earle平衡鹽溶液含較高的NaH-C03(2.2g/L),,適合于5%C02的培養(yǎng)條件。浙江無酚紅平衡鹽溶液報價平衡鹽溶液可滿足體外實驗中組織,、細胞的生存和代謝的基本需要,。
平衡鹽溶液是溶液中電解質(zhì)含量與血漿內(nèi)含量相仿的鹽溶液稱為平衡鹽溶液。等滲鹽水含Na+和Cl-為154mmol/L,,而血液內(nèi)Na+和Cl-含量分別為142mmol/L和103mmol/L,,兩者相比,等滲鹽水的Cl-含量比血液的Cl-含量高50mmol/L,,在重度缺水或休克狀態(tài)下,,腎臟血液減少,會影響正常的排氯功能,,從靜脈內(nèi)輸給大量等滲鹽水,,有導(dǎo)致血Cl-過高,引起高氯性酸中毒的危險,。因此,,用等滲鹽水***缺水有不足之處,而使用平衡鹽溶液可避免輸入過多的Cl-,,***缺水更符合生理,,且能有助于糾正酸中毒。常用的平衡鹽溶液有乳酸鈉和復(fù)方氯化鈉溶液(1/6M乳酸鈉溶液1/3加復(fù)方氯化鈉溶液2/3);與碳酸氫鈉和等滲鹽水溶液(1.25%碳酸氫鈉溶液1/3和等滲鹽水2/3)兩種,。
平衡鹽溶液是一種用于實驗室和生物技術(shù)領(lǐng)域的溶液,,用于維持細胞和組織的滲透壓和離子平衡。以下是一些常用的平衡鹽溶液配方:1.PBS(磷酸鹽緩沖液):PBS是常用的細胞培養(yǎng)和洗滌細胞的緩沖液,。它的配方如下:-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-Na2HPO4:1.44g/L-KH2PO4:0.24g/L-調(diào)節(jié)pH至7.42.D-PBS(無鈣鎂磷酸鹽緩沖液):D-PBS與PBS相似,,但不含有鈣鎂離子,,適用于細胞洗滌和蛋白實驗。-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-Na2HPO4:1.44g/L-KH2PO4:0.24g/L-調(diào)節(jié)pH至7.43.HEPES緩沖液:HEPES是一種弱酸,,用于維持細胞培養(yǎng)的pH穩(wěn)定,。-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-MgCl2:0.2g/L-CaCl2:0.2g/L-HEPES:1.2g/L-調(diào)節(jié)pH至7.44.TBS(Tris緩沖鹽水):TBS是一種常用的緩沖液,用于蛋白質(zhì)電泳和免疫學(xué)實驗,。-Trisbase:12.1g/L-Glycine:2.38g/L-NaCl:8.8g/L-調(diào)節(jié)pH至8.05.DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium):DMEM是一種常用的細胞培養(yǎng)液,,含有較高濃度的葡萄糖和氨基酸。-DMEM粉末:100g/L-NaHCO3:1.5g/L-調(diào)節(jié)pH至7.4這些平衡鹽溶液的配方可以根據(jù)實驗需求進行調(diào)整,,如添加***,、血清等。使用時,,請確保按照配方準(zhǔn)確配制,,并注意無菌操作。HBSS 的碳酸氫鈉水平較低,,用于在沒有 CO2 的情況下培養(yǎng),。
方法二:母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取2gNaH2PO4-2H2O,,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可,。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可,。如:0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,,加水稀釋至1000ml即可,。若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可,。PBS并不一定是中性,,而是有要求的,不同的用途pH值不同,。中國澳門HBSS平衡鹽溶液哪家好
平衡鹽溶液細胞培養(yǎng)緩沖液——PBS/DPBS,。中國澳門HBSS平衡鹽溶液哪家好
(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和減少有關(guān)成分的化學(xué)反應(yīng),此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲存液(母液)?,F(xiàn)以l0×為例,,將其配制方法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,補足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑(含12H2O者),,補足三蒸水至500ml。,、乙液等量用三蒸水稀釋10倍,,即成使用液。用前高壓滅菌,。例如配制1000m1Hanks使用液,,則取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混勻,,用(115℃)高壓滅菌15分鐘。臨用時,,用,。3.無鈣鎂Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,,也稱D-Hanks液,。D-Hanks與Hanks液的一個主要區(qū)別是前者不含鈣和鎂,常用于配制胰蛋白酶等溶液,;而Hanks液*含,,不能用于5%C02的環(huán)境,若放于C02孵箱中,,溶液將迅速變酸,,使用時應(yīng)注意D-Hanks與Hanks液的這些區(qū)別?!靖健浚簽榕渲粕鲜鯤anks液,,應(yīng)先配好。配制方法如下:稱取,,置玻璃研缽中細研,,逐漸加入,要記好加NaOH的量,,共加至,,將研好的酚磺酞液用吸管移入燒瓶中加三蒸水(113℃)高壓滅菌15分鐘。 中國澳門HBSS平衡鹽溶液哪家好