胰蛋白酶：（Trypsin）為蛋白酶的一種，是從牛,、羊,、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,，主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端,。按干燥品計算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位,。作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散,。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度,、溫度和作用時間有關(guān),，在pH為、溫度為37℃時,，胰酶溶液的作用能力**強(qiáng),。使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度,、溫度和時間,，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。終止消化時,，可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對細(xì)胞的作用,。有些細(xì)胞容易消化（如雞胚原代成纖維細(xì)胞）可用胰酶進(jìn)行消化，可以不加EDTA,。 胰酶可在-20℃下保存一年,。廣東重組胰酶

    胰蛋白酶用法用量1.每次～5mg，用蒸餾水5～10ml溶解,。2.一般應(yīng)用：1次5000單位,，每日1次肌注，用量酌情而定。為防止疼痛,，可加適量普魯卡因,。局部用*視情而定，可配成溶液制劑（～,，微堿性時活性**強(qiáng)）,、噴霧劑、粉劑,、油膏等,，用作體腔內(nèi)注射、患部注射,、噴霧,、濕敷、涂搽等,。3.治蛇毒：取注射用結(jié)晶胰蛋白酶2000單位1～3支,，加～（或注射用水）4～20ml稀釋，以牙痕為中心,，在傷口周圍作浸潤注射,，或在腫脹部位上方作環(huán)狀封閉1～2次。如病情需要可重復(fù)使用,。若傷肢腫脹明顯,，可于注射本品30分鐘后，切開傷口排毒減壓（嚴(yán)重出血者例外）,，也可在腫脹部位針刺排毒,。如傷口已壞死、潰爛,，可用其***胰蛋白酶注意事項(xiàng)1.不可作靜注,。用前需作劃痕試驗(yàn)，應(yīng)注意可能產(chǎn)生過敏反應(yīng),。2.吸取注射液后應(yīng)另換針頭,，以免注射時疼痛。3.外用時,，可采用注射用制劑以緩沖液溶解,，但必須在3小時內(nèi)用畢。胰蛋白酶不良反應(yīng)：1．注射局部疼痛,、硬結(jié),。2．本品可引起組胺釋放，產(chǎn)生全身反應(yīng),，有寒戰(zhàn),、發(fā)熱,、***、頭暈,、胸痛,、***、皮疹,、血管神經(jīng)性水腫、呼吸困難,、眼壓升高,、白細(xì)胞減少等。癥狀輕時不影響繼續(xù)***,，給予抗組胺*和對癥*物即可控制,，嚴(yán)重時應(yīng)即停*。3．本品偶可致過敏性休克,。廣東重組胰酶EDTA是乙二胺四乙酸,，一種金屬螯合劑。

0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑,，下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題,。

胰酶的使用濃度是多少？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液,。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年,。隨著時間延長，胰酶的消化能力減弱,。胰酶可分裝凍存,，在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存,。胰酶使用的時候要注意什么,？（1）在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。（2）胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差,。

    在253nm的波長處測定吸光度，必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié),，使吸光度在～,，作為底物溶液。制成后應(yīng)在2小時內(nèi)使用,。供試品溶液的制備精密稱取本品適量,，加～60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液,，加μl,，混勻，作為空白。另取供試品溶液200μl,，加底物溶液（恒溫于℃±℃）,，立即計時，混勻,，使比色池內(nèi)的溫度保持在25℃±℃,，照紫外－可見分光光度法（2010年版*典二部附錄ⅣA），在253nm的波長處,，每隔30秒鐘讀取吸光度,，共5分鐘。以吸光度為縱坐標(biāo),，時間為橫坐標(biāo),，作圖；每30秒鐘吸光度的改變應(yīng)恒定在～,，呈線性關(guān)系的時間不得少于3分鐘,。若不符合上述要求，應(yīng)調(diào)整供試品溶液的濃度,，再作測定,。在上述吸光度對時間的關(guān)系圖中，取成直線部分的吸光度,，按下式計算：式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量,，單位；A1為直線上終止的吸光度,；A2為直線上開始的吸光度,；T為A1至A2讀數(shù)的時間，分,；W為測定液中含供試品的量,，mg；,，吸光度每分鐘改變,，即相當(dāng)于1個胰蛋白酶單位。胰蛋白酶制劑注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的醫(yī)學(xué)檢查胰蛋白酶檢查名稱胰蛋白酶胰蛋白酶分類血液生化檢查>酶類測定胰蛋白酶胰蛋白酶的測定原理同酶速率法測定,。胰蛋白酶消化液都由已經(jīng)過豬細(xì)小病毒檢測和支原體檢測的原料制備,。

    一、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)簡介：EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需的EDTA是乙二胺四乙酸,，一種金屬螯合劑,。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性,，因此在使用胰蛋白酶消化液時應(yīng)添加EDTA,。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用,。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需材料及試劑：PBS,氫氧化鈉,EDTA,三,、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)步驟：1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為％,，即將。注意,，盡量不要用水溶解,，因?yàn)楸仨毐３譂B透壓。％％,，可根據(jù)細(xì)胞消化的難度進(jìn)行調(diào)整,。不需要EDTA，可以省略易于消化的細(xì)胞,。EDTA對細(xì)胞粘附有影響，因此應(yīng)大量使用,。如果影響粘附,，則必須將其用于消化，在用完全培養(yǎng)基終止消化后,，離心并棄去上清液,，然后添加完全培養(yǎng)基以進(jìn)行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,，則不要離心,。。用磷酸酶稀釋PBS,。4.請注意,，血清可以阻止血漿酶的作用，但不能阻止EDTA,。對于某些細(xì)胞,，有必要在消化后停止離心。5.當(dāng)pH約為8時,，磷酸酶和EDTA**易溶解,。在制備過程中，您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8,。請注意,，磷酸酶會使溶液變酸，因此您應(yīng)隨時溶解時測量pH值,。調(diào)整,。請注意，不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉,，否則電池將無法承受堿的作用,。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,，使細(xì)胞分離,。黑龍江進(jìn)口胰酶報價

消化液經(jīng)過過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,，或者一些組織的消化,。廣東重組胰酶

    (含)英文名:(含)儲存條件:-20℃產(chǎn)品簡介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化,。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃,。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌,。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。使用說明(*供參考):1.貼壁細(xì)胞的消化①吸除培養(yǎng)液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,去除殘余的血清,。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置,。(不同的細(xì)胞消化時間有所不同)③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化,。⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落。 廣東重組胰酶