**早開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM），其本質(zhì)為含有鹽,、氨基酸,、維生素和其他必需營(yíng)養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上,，DMEM,、IMDM、HAMF12,、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開(kāi)發(fā)出來(lái),。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹，其特性及應(yīng)用的范圍見(jiàn)表1-2,。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細(xì)胞培養(yǎng)基添加適量的血清后,，可***用于多種細(xì)胞培養(yǎng),，并用于**學(xué)、*苗生產(chǎn)等,。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基MEM（MinimalEssentialMedium）培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓**型的,，也有過(guò)濾**型的,；還有含非必需氨基酸的類型。是**基本,、適用范圍**廣的細(xì)胞培養(yǎng)基,。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的，各成分份量加倍,，分低糖（1000mg/L）,、高糖（4500mg/L）兩種類型。細(xì)胞生長(zhǎng)快,。附著稍差的腫*細(xì)胞,、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好，常用于雜交*的骨髓*細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng),。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等?？捎糜陔s交*細(xì)胞培養(yǎng),。減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題

    培養(yǎng)實(shí)例7和對(duì)比培養(yǎng)例7的誘導(dǎo)結(jié)果比較：：用上述方法進(jìn)行水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)時(shí),，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷**形態(tài)大小均相近,，出愈率均為100％。如圖7所示,。培養(yǎng)實(shí)例8：液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較：a,、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基：通常多種因素會(huì)導(dǎo)致相同超純水制水機(jī)產(chǎn)出的超純水ph變動(dòng)較大，ph通常為,。分別選取ph為,、、,、,、、,，分別配制ms液體培養(yǎng)基,、cs液體培養(yǎng)基、1/2ms液體培養(yǎng)基,、1/2cs液體培養(yǎng)基,，制作方法為：ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l。b,、結(jié)果為：用ph為,，ms液體培養(yǎng)基ph為，cs液體培養(yǎng)基ph為,，1/2ms液體培養(yǎng)基ph為,，1/2cs液體培養(yǎng)基ph為。植物**適宜生長(zhǎng)的ph一般為,，觀察可知,，ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動(dòng)較大，其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時(shí)通常需要調(diào)節(jié)ph,，過(guò)程繁瑣,，相比之下。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題無(wú)血清培養(yǎng)基適合于無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng),。

    無(wú)芽孢：E=209—250*103J/mol,。顯然，（5）式的比值〉1,，說(shuō)明提高溫度對(duì)于第二個(gè)平行反應(yīng),，即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,，雖然兩個(gè)平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,，但是，達(dá)到同樣的**效果,，所需要的時(shí)間卻縮短了,，由于***個(gè)反應(yīng)也就是營(yíng)養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少，因此,，有利于減少培養(yǎng)基在**過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,。換言之，高溫短時(shí)**對(duì)于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分是有利的,。通常所說(shuō)的高溫短時(shí)**可以提高生產(chǎn)效益,，其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1：當(dāng)**溫度上升時(shí),，微生物殺死速率的提高要超過(guò)培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加,。要減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度**,。結(jié)論2：在**時(shí)選擇較高的溫度,、較短的時(shí)間,，這樣便既可達(dá)到需要的**程度，同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失,。（二）,、影響**效果的因素（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。（2）初始菌量：在保持N值不變的前提下,，t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比,。（3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性,。(4)傳熱與混合狀況：影響受熱均勻度,。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度,。(7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率三,、培養(yǎng)基的工業(yè)**。

    此法由巴斯德創(chuàng)立,，用于酒類消毒而得名,。目前用于牛乳消毒。方法有兩種：一種為℃加熱15秒,，另一種為63-66℃加熱30分鐘,。大多采用第一種方法。(2)煮沸法,。在1個(gè)大氣壓下,，水煮沸后溫度達(dá)100℃，煮沸5分鐘后可殺死一般**繁殖體,。如于水中加入2%碳酸鈉,，可將其沸點(diǎn)提高至105℃，既可促進(jìn)芽胞的殺滅,，又可防止金屬器皿生銹,。(3)流通蒸氣消毒法。又稱常壓蒸氣消毒法,，常用附諾(Amold)流通蒸氣**器,，利用1個(gè)大氣壓下100℃水蒸氣進(jìn)行消毒，10-30分鐘后**繁殖體被殺死,，但對(duì)芽孢作用不大,。(4)間歇**法（fractionalsterilization）。采用間歇方式達(dá)到**目的,。將**物品置于阿諾流通蒸氣**器內(nèi),，100℃加熱15-30分鐘，每日1次，連續(xù)3次,。每次**后取出物品置37℃孵育箱過(guò)夜,，致殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過(guò)流通蒸氣**器加熱而被殺滅,。如此反復(fù),，既可殺滅芽胞，又可使不耐高溫的物質(zhì)免受影響,。若某些物質(zhì)不耐100攝氏度,，則可將溫度下降至75-80℃，每次加熱時(shí)間延長(zhǎng)到30-60分鐘,，常用血清凝固器對(duì)呂氏血清培養(yǎng)基和L-J培養(yǎng)基的**屬此方法。(5)高壓蒸氣火菌法,。利用密閉的耐高壓蒸氣**器(autoclave),，在蒸氣不外溢的條件下，使鍋內(nèi)壓力增高,，隨之蒸氣溫度也增高,。通常在℃。減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性,。

    從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱,、加熱**及冷卻過(guò)程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)**流程要長(zhǎng)些,，但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過(guò)程同時(shí)也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻,，因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。（2）蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器,，它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,，從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的**溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間**，**后的培養(yǎng)基通過(guò)一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻,，從圖中可以看出,，由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重,，同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出,，避免了過(guò)熱或**不徹底等現(xiàn)象。（3）由連消塔,、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括：①配料預(yù)熱罐,，將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃，以避免連續(xù)**時(shí)由于料液與蒸汽溫度過(guò)大而產(chǎn)生水汽撞擊聲,；②連消塔,，連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和，并使料液的溫度很快升高到**溫度（126-132）℃；③維持罐,，連消塔加熱的時(shí)間很短,，光靠這段時(shí)間的**是不夠的，維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min,，以達(dá)到**的目的,；④冷卻管，從維持罐出來(lái)的料液要經(jīng)過(guò)冷卻排管進(jìn)行冷卻,。無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。廣西Ham's F12培養(yǎng)基進(jìn)口

無(wú)血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件,。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,，培養(yǎng)基在高溫**的過(guò)程中，其營(yíng)養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級(jí)反應(yīng)來(lái)描述其反應(yīng)速度：式中—表示營(yíng)養(yǎng)成分破環(huán)的速率,，C：表示營(yíng)養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù),，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系,，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù),，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度,，k同樣,，**過(guò)程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫(xiě)成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2,，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2,；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過(guò)程實(shí)際上是營(yíng)養(yǎng)成分破壞,、菌體死亡的兩個(gè)平行性反應(yīng),，對(duì)于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高,，其兩個(gè)平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加,，但增加的幅度（大小）卻不同,，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實(shí)驗(yàn)證明：營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol,；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題