**早開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM）,，其本質(zhì)為含有鹽,、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物,。在此基礎(chǔ)上,，DMEM、IMDM,、HAMF12,、PRMI1640等各種合成細胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來,。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細介紹,，其特性及應(yīng)用的范圍見表1-2。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細胞培養(yǎng)基添加適量的血清后,，可***用于多種細胞培養(yǎng),，并用于**學、*苗生產(chǎn)等,。MEM細胞培養(yǎng)基MEM（MinimalEssentialMedium）培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓**型的,，也有過濾**型的,；還有含非必需氨基酸的類型。是**基本,、適用范圍**廣的細胞培養(yǎng)基,。DMEM細胞培養(yǎng)基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的，各成分份量加倍,，分低糖（1000mg/L）,、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快,。附著稍差的腫*細胞,、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好，常用于雜交*的骨髓*細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng),。IMDM細胞培養(yǎng)基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等?？捎糜陔s交*細胞培養(yǎng),。減血清培養(yǎng)基提高了實驗結(jié)果的可靠性。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見問題

    培養(yǎng)實例7和對比培養(yǎng)例7的誘導結(jié)果比較：：用上述方法進行水稻成熟胚愈傷**誘導時,，cs誘導培養(yǎng)基與ms誘導培養(yǎng)基誘導出的愈傷**形態(tài)大小均相近,，出愈率均為100％。如圖7所示,。培養(yǎng)實例8：液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較：a,、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基：通常多種因素會導致相同超純水制水機產(chǎn)出的超純水ph變動較大,，ph通常為。分別選取ph為,、,、、,、,、，分別配制ms液體培養(yǎng)基,、cs液體培養(yǎng)基,、1/2ms液體培養(yǎng)基、1/2cs液體培養(yǎng)基,，制作方法為：ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,；1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l,。b、結(jié)果為：用ph為,，ms液體培養(yǎng)基ph為,，cs液體培養(yǎng)基ph為，1/2ms液體培養(yǎng)基ph為,，1/2cs液體培養(yǎng)基ph為,。植物**適宜生長的ph一般為，觀察可知,，ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動較大,，其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時通常需要調(diào)節(jié)ph，過程繁瑣,，相比之下,。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見問題無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細胞培養(yǎng)。

    無芽孢：E=209—250*103J/mol,。顯然,，（5）式的比值〉1，說明提高溫度對于第二個平行反應(yīng),，即菌體死亡的反應(yīng)是有利的,。提高溫度，雖然兩個平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,，但是,，達到同樣的**效果，所需要的時間卻縮短了，由于***個反應(yīng)也就是營養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,，因此,，有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之,，高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的,。通常所說的高溫短時**可以提高生產(chǎn)效益，其理論根據(jù)就在于此,。結(jié)論1：當**溫度上升時,，微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞,，可升高溫度**,。結(jié)論2：在**時選擇較高的溫度、較短的時間,，這樣便既可達到需要的**程度,，同時又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失,。（二）,、影響**效果的因素（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。（2）初始菌量：在保持N值不變的前提下,，t與初始菌量N0的對數(shù)成正比,。（3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性,。(4)傳熱與混合狀況：影響受熱均勻度,。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度,。(7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率三,、培養(yǎng)基的工業(yè)**。

    此法由巴斯德創(chuàng)立,，用于酒類消毒而得名,。目前用于牛乳消毒。方法有兩種：一種為℃加熱15秒,，另一種為63-66℃加熱30分鐘,。大多采用第一種方法。(2)煮沸法,。在1個大氣壓下,，水煮沸后溫度達100℃，煮沸5分鐘后可殺死一般**繁殖體,。如于水中加入2%碳酸鈉,，可將其沸點提高至105℃，既可促進芽胞的殺滅，又可防止金屬器皿生銹,。(3)流通蒸氣消毒法,。又稱常壓蒸氣消毒法，常用附諾(Amold)流通蒸氣**器,，利用1個大氣壓下100℃水蒸氣進行消毒,，10-30分鐘后**繁殖體被殺死，但對芽孢作用不大,。(4)間歇**法（fractionalsterilization）,。采用間歇方式達到**目的。將**物品置于阿諾流通蒸氣**器內(nèi),，100℃加熱15-30分鐘,，每日1次，連續(xù)3次,。每次**后取出物品置37℃孵育箱過夜,，致殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過流通蒸氣**器加熱而被殺滅,。如此反復,，既可殺滅芽胞，又可使不耐高溫的物質(zhì)免受影響,。若某些物質(zhì)不耐100攝氏度,，則可將溫度下降至75-80℃，每次加熱時間延長到30-60分鐘,，常用血清凝固器對呂氏血清培養(yǎng)基和L-J培養(yǎng)基的**屬此方法,。(5)高壓蒸氣火菌法。利用密閉的耐高壓蒸氣**器(autoclave),，在蒸氣不外溢的條件下,，使鍋內(nèi)壓力增高，隨之蒸氣溫度也增高,。通常在℃,。減血清培養(yǎng)基提高了實驗的可重復性。

    從而使培養(yǎng)基的預熱,、加熱**及冷卻過程可在同一設(shè)備內(nèi)完成,。該流程的加熱和冷卻時間比噴射加熱連續(xù)**流程要長些，但由于在培養(yǎng)基的預熱過程同時也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻,，因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量,。（2）蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器，它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,，從而在短時間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預定的**溫度然后在該溫度下維持一段時間**,，**后的培養(yǎng)基通過一膨脹閥進入真空冷卻器急速冷卻，從圖中可以看出，由于該流程中培養(yǎng)基受熱時間短,，營養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴重,，同時該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出，避免了過熱或**不徹底等現(xiàn)象,。（3）由連消塔,、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括：①配料預熱罐，將配制好的料液預熱到60-70℃,，以避免連續(xù)**時由于料液與蒸汽溫度過大而產(chǎn)生水汽撞擊聲,；②連消塔，連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和,，并使料液的溫度很快升高到**溫度（126-132）℃,；③維持罐，連消塔加熱的時間很短,，光靠這段時間的**是不夠的,，維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min，以達到**的目的,；④冷卻管,，從維持罐出來的料液要經(jīng)過冷卻排管進行冷卻。無酚紅培養(yǎng)基確保了實驗結(jié)果的準確性,。廣西Ham's F12培養(yǎng)基進口

無血清培養(yǎng)基提供了純凈的細胞培養(yǎng)環(huán)境,。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見問題

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實驗研究結(jié)果表明,，培養(yǎng)基在高溫**的過程中，其營養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級反應(yīng)來描述其反應(yīng)速度：式中—表示營養(yǎng)成分破環(huán)的速率,，C：表示營養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù),，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系,，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù),，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度,，k同樣,，**過程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2,，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2,；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過程實際上是營養(yǎng)成分破壞,、菌體死亡的兩個平行性反應(yīng),，對于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高，其兩個平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加,，但增加的幅度（大?。﹨s不同，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實驗證明：營養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol,；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol,。新疆DMEM高糖培養(yǎng)基常見問題