“做miRNA下調(diào),，QPCR檢測(cè)miRNA，表達(dá)水平無(wú)變化”,，這到底是怎么回事,？現(xiàn)有miRNA抑制手段,，無(wú)論是基于載體構(gòu)建的、還是化學(xué)合成的,，本質(zhì)上都是用跟成熟體互補(bǔ)的反義miRNA（miRNA海綿體屬于不完全互補(bǔ)的反義RNA重復(fù)）,，其可以通過(guò)結(jié)合miRNA，阻斷其與靶基因結(jié)合,，但并不能有效引發(fā)miRNA的降解,，原因有兩方面：其一是反義RNA與miRNA結(jié)合后，序列很短,，導(dǎo)致Dicer酶（細(xì)胞內(nèi)降解雙鏈RNA的主角）不能有效結(jié)合,；其二是miRNA與Ago2以RISC復(fù)合物的形式存在，該復(fù)合物也會(huì)導(dǎo)致Dicer酶無(wú)法高效結(jié)合,。因此,，如果以反義RNA技術(shù)抑制miRNA功能，QPCR可以做,，如果檢測(cè)出表達(dá)水平下降還好,，即便未檢測(cè)到，也不表示抑制無(wú)效,，正確的做法是直接檢測(cè)目的基因蛋白水平是否有上調(diào),。但若實(shí)驗(yàn)者不清楚靶基因的情況下,，不檢測(cè)到miRNA下調(diào),，心里是沒(méi)底的,。瑞普信生物技術(shù)有限公司專(zhuān)業(yè)的第三方檢測(cè)Western Blot,。云南慢病毒第三方檢測(cè)中心

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