Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴(kuò)增的得力助手在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)是不可或缺的工具,,廣泛應(yīng)用于基因克隆,、基因表達(dá)分析,、遺傳病診斷、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域,。而一款PCR反應(yīng)體系則是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵,。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨(dú)特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要,。一,、熱啟動(dòng)機(jī)制:開(kāi)啟擴(kuò)增之門(mén)Hot-Start技術(shù)是該Master Mix的亮點(diǎn)之一。在常規(guī)PCR反應(yīng)中,,由于Taq酶在室溫下就具有活性,,容易導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合和延伸,從而產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,。而Hot-Start Taq Master Mix通過(guò)特殊的化學(xué)修飾或抗體封閉技術(shù),在反應(yīng)初期將Taq酶的活性暫時(shí)抑制,,只有當(dāng)反應(yīng)體系升溫至一定溫度時(shí),,修飾或抗體才會(huì)被破壞,Taq酶活性得以釋放,。這一機(jī)制有效避免了低溫下的非特異性擴(kuò)增,,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和準(zhǔn)確性,尤其適用于復(fù)雜模板,、低豐度靶基因以及對(duì)特異性要求極高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,。Phusion Master Mix對(duì)各種類(lèi)型的DNA模板(如基因組DNA、質(zhì)粒DNA和cDNA)均表現(xiàn)出良好的兼容性,。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag
一,、主要特點(diǎn):免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專(zhuān)為血液樣本設(shè)計(jì)的高效PCR預(yù)混液,能夠直接從全血或干血斑中擴(kuò)增DNA,,無(wú)需進(jìn)行繁瑣的DNA提取和純化步驟,。這種預(yù)混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),,這些酶經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,,包括抗凝劑(如EDTA,、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學(xué)物質(zhì),。此外,,該預(yù)混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴(kuò)增DNA,,適用于人類(lèi),、小鼠等哺乳動(dòng)物的全血樣本。二,、性能:高保真性與長(zhǎng)片段擴(kuò)增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優(yōu)勢(shì)之一是其高保真性,。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,,能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性,。這對(duì)于需要高精度的基因克隆和測(cè)序?qū)嶒?yàn)尤為重要。此外,,該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5kb甚至更長(zhǎng)的DNA片段,,適用于多種復(fù)雜的基因組分析。例如,,它可以輕松擴(kuò)增人類(lèi)基因組中的長(zhǎng)片段,,如IL-6基因的4882bp片段。Recombinant Human R spondin 3/RSPO3 Protein,His TagUBE2L3在調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路中的作用可能對(duì)免疫反應(yīng)和炎癥過(guò)程至關(guān)重要,。
高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,,結(jié)合抗體封閉技術(shù),有效避免了低溫條件下的非特異性擴(kuò)增,,提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度,。探針?lè)╭PCR通過(guò)熒光探針與目標(biāo)基因的特異性結(jié)合,避免了非特異性產(chǎn)物的干擾,,檢測(cè)靈敏度和特異性高于傳統(tǒng)的SYBR Green方法,。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動(dòng)參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,,減少因移液誤差或樣品蒸發(fā)等因素引起的熒光波動(dòng),,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。UDG防污染系統(tǒng)內(nèi)置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統(tǒng),,通過(guò)降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,,有效防止了實(shí)驗(yàn)室中殘留的PCR產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn),??焖贁U(kuò)增與多重檢測(cè)優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速擴(kuò)增程序,,可在短時(shí)間內(nèi)完成高靈敏度檢測(cè),同時(shí)適用于多重PCR檢測(cè),,可在單個(gè)反應(yīng)孔中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因,。適用性該試劑適用于多種樣本類(lèi)型,包括cDNA,、基因組DNA等,,尤其適合低豐度基因的定量檢測(cè),如低表達(dá)的mRNA,、lncRNA,、小RNA等。
產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性SYBRGreen是一種熒光染料,,能夠特異性地結(jié)合到雙鏈DNA的小溝區(qū)域,。在qPCR過(guò)程中,隨著DNA鏈的延伸,,SYBRGreen的熒光信號(hào)不斷增強(qiáng),,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的實(shí)時(shí)定量。這種染料的結(jié)合特異性極高,,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。即使在低濃度的模板條件下,,也能檢測(cè)到目標(biāo)基因的存在,,靈敏度可達(dá)單拷貝水平。2×預(yù)混體系,,操作簡(jiǎn)便該產(chǎn)品采用2×預(yù)混體系,,預(yù)先將Taq酶、dNTPs,、MgCl?等關(guān)鍵組分混合均勻,,實(shí)驗(yàn)人員需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng)。這種預(yù)混體系簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,,減少了人為誤差,,同時(shí)保證了反應(yīng)體系的均一性和穩(wěn)定性。無(wú)論是初學(xué)者還是經(jīng)驗(yàn)豐富的研究人員,,都能輕松上手,,快速開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。低ROX參比染料,,減少背景干擾ROX染料作為qPCR反應(yīng)中的參比染料,,用于校正孔間熒光信號(hào)的差異。然而,,過(guò)高的ROX濃度可能會(huì)引入背景熒光,,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)采用了低濃度的ROX染料,有效降低了背景干擾,,提高了熒光信號(hào)的信噪比,,使得定量結(jié)果更加精確可靠。Pfu DNA Polymerase的突變體研究:通過(guò)研究Pfu DNA Polymerase的突變體,,可進(jìn)一步優(yōu)化其性能和應(yīng)用范圍,。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇,。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和熒光染料,為效率,、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持,。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,、dNTPs、增強(qiáng)劑以及熒光染料,。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用,。通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度,。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點(diǎn),。這種染料在PCR過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度,。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,,還減少了人為操作帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析,。此外,,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,,即可直接進(jìn)行反應(yīng),,減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。去泛素化酶可以去除泛素化標(biāo)記,,這一步驟是泛素化過(guò)程的逆轉(zhuǎn)過(guò)程,,它允許細(xì)胞對(duì)泛素化事件進(jìn)行精細(xì)調(diào)控。Recombinant Biotinylated Human ENPP-1 Protein,His-Avi Tag
通過(guò)測(cè)序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和測(cè)序)來(lái)驗(yàn)證gRNA的編輯效率,篩選出效率高的gRNA序列 ,。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag
在分子生物學(xué)研究中,,RNA的完整性和純度是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素。5×RNALoadingBuffer作為一種專(zhuān)為RNA非變性凝膠電泳設(shè)計(jì)的上樣緩沖液,,憑借其獨(dú)特配方和性能,,為RNA分析提供了可靠的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高效沉降與指示功能5×RNALoadingBuffer的主要成分包括甘油,、EDTA,、溴酚藍(lán)和二甲苯青。甘油的高密度特性能夠使RNA樣品在凝膠電泳中順利沉入加樣孔,,而溴酚藍(lán)和二甲苯青則作為指示劑,,幫助實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)電泳進(jìn)程。無(wú)RNase污染該緩沖液經(jīng)過(guò)DEPC(焦碳酸二乙酯)處理,,確保無(wú)RNase污染,,從而有效保護(hù)RNA樣品免受降解,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,。優(yōu)化的配方5×RNALoadingBuffer含有5mMEDTA,,能夠螯合二價(jià)金屬離子,進(jìn)一步防止RNA在電泳過(guò)程中被降解,。操作簡(jiǎn)便使用時(shí)只需將RNA樣品與1/4體積的5×RNALoadingBuffer混合,,即可直接上樣電泳。這種簡(jiǎn)便的操作流程提高了實(shí)驗(yàn)效率,。適用性該緩沖液適用于多種類(lèi)型的RNA樣品,,包括小分子RNA和長(zhǎng)鏈RNA,且在非變性條件下能夠保持RNA的天然結(jié)構(gòu),。穩(wěn)定的保存條件5×RNALoadingBuffer在-20℃條件下可保存兩年,室溫運(yùn)輸也不會(huì)影響其性能,,這為實(shí)驗(yàn)室的長(zhǎng)期使用提供了便利,。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag