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來源: 發(fā)布時間:2025-04-28

DNA探針(DNA probe)是**常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,,用特殊示蹤劑(如同位素,、酶或有色基團)進行標記;在適當?shù)膒H值,、溫度和離子強度下,,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合(雜交),,形成雙鏈復合物(雜交體)。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補程度,。在嚴格的條件下(高pH值,、高溫、低離子強度),,不完全匹配的雜交體的兩鏈將會解離,,而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對結合的探針洗去后,,可用放射自顯影或酶聯(lián)反應等檢測系統(tǒng)檢測雜交反應結果,。可以進行點,、線掃描(得到層成分分布信息),、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。寶山區(qū)標準探針商家

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在原核表達系統(tǒng)中外源基因不僅進行正向轉錄,,有時還存在反向轉錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達不高的重要原因。另外,,在真核系統(tǒng),,某些基因也存在反向轉錄,產(chǎn)生反義RNA,,參與自身表達的調控,。在這些情況下,要準確測定正向和反向轉錄水平就不能用雙鏈DNA探針,,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針,。探針是能與特異靶分子反應并帶有供反應后檢測的合適標記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補的原理,,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,,與被測定的靶序列互補,以檢測被測靶序列的技術叫核酸探針技術,。探針制備就是將目的基因進行標記,。楊浦區(qū)品牌探針品牌探針卡是一種測試接口,主要對裸芯進行測試,,通過連接測試機和芯片,,通過傳輸信號對芯片參數(shù)進行測試.。

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電子探針X射線顯微分析儀(簡稱電子探針)利用約1Pm的細焦電子束,,在樣品表層微區(qū)內激發(fā)元素的特征X射線,,根據(jù)特征X射線的波長和強度,進行微區(qū)化學成分定性或定量分析,。電子探針的光學系統(tǒng),、真空系統(tǒng)等部分與掃描電鏡基本相同,通常也配有二次電子和背散射電子信號檢測器,,同時兼有組織形貌和微區(qū)成分分析兩方面的功能,。電子探針的構成除了與掃描電鏡結構相似的主機系統(tǒng)以外,還主要包括分光系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)等部分,。電子探針主要由電子光學系統(tǒng)(鏡筒),X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成,。電子探針和掃描電鏡在電子光學系統(tǒng)的構造基本相同,,它們常常組合成單一的儀器。

特異性探針有三種形式——cDNA,、RNA,、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針,。RNA探針用途很廣,,也容易獲得,,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,,將特定的基因片段裝載到質?;蚴删w中,經(jīng)過擴增、酶切、純化等復雜的步驟,,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復雜,,有相應條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,,由核酸合成儀來完成,,可廉價獲得大量的此類探針。質量也相對來說更為穩(wěn)定,。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,,所以有良好的信號放大作用,但其滲透性比較差,。寡核苷酸探針一般為十數(shù)個至數(shù)十個堿基,,滲透性強,但信號放大作用則較差,,合成的多相寡核苷酸探針,,敏感性可以達到cDNA探針水平。電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,,不同的元素有不同的X射線特征波長和能量,。

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2)X射線能譜分析法。無須分析晶體,,而直接將探測器接收的訊號加以放大,,進行脈沖幅度分析,通過選擇不同的脈沖幅度來確定入射x射線的能量,,從而區(qū)分不同的特征X射線,。計算時應用布拉格方程:nλ=2dsinθ。 [2]1,、能進行微區(qū)分析,。可分析數(shù)個μm3內元素的成分,。2,、能進行現(xiàn)場分析。無需把分析對象從樣品中取出,,可直接對大塊試樣中的微小區(qū)域進行分析,。把電子顯微鏡和電子探針結合,,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來。3,、分析范圍廣,。Z>4其中,波譜:Be~U,,能譜:Na~U。對于任意一個給定的入射角θ有一個確定的波長λ滿足衍射條件,。崇明區(qū)特制探針維修價格

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DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),,可以是基因的全序列,,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經(jīng)轉錄獲得mRNA,,再通過逆轉錄得到的探針,,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發(fā)展和應用,。要得到一種特異性DNA探針,,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,,細菌的基因組大小約為5×106堿基,,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫,然后用多種其他菌種的DNA探針來篩選,,產(chǎn)生雜交信號的克隆被剔除,,***剩下的不與任何其他細菌雜交的克隆則可能含有該細菌特異性DNA片段。寶山區(qū)標準探針商家

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