PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下,，由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),，三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),，以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,，第一步，模板DNA變性,，以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板,，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,，模板DNA與引物退火（復(fù)性）,，模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補配對,。第三步,，引物的延伸，DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,，70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈,。這三個步驟為一個循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個循環(huán),，2-3小時就能使極微量的DNA,、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,，從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,，因此PCR反應(yīng)具有高度特異性,。在準(zhǔn)確的前提下，高效顯得尤為重要,。動物用PCR檢測方法

寵物在疾病傳染的初期,，臨床病癥并不明顯，病原的數(shù)量還不足以讓檢測板或血液抹片鏡檢兩種方式觀察到,。目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內(nèi)是否產(chǎn)生對抗某種病原的抗體,，雖然快速，但在初期傳染時，寵物免疫系統(tǒng)尚未產(chǎn)生抗體,，所以檢測出現(xiàn)偽陰性,，進而延誤診療。巧亦捷PCR檢測試劑檢測靈敏度高,；且可以消除細菌性疾病原菌假陽性的可能,。可應(yīng)用于犬瘟,、犬細小病毒,、弓形蟲等寵物致病菌的檢測，從根本上突破了免疫學(xué)間接檢測的局限,。動物用PCR檢測方法微流控PCR技術(shù)是一種通過將PCR反應(yīng)微型化來實現(xiàn)PCR反應(yīng)的高通量,、低成本和快速的方法。

巧亦捷全自動薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術(shù),，保障結(jié)果準(zhǔn)確：其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴增技術(shù),，能夠?qū)⑸飿?biāo)志物精確定量，同時輸出Ct值和擴增曲線,，結(jié)果判讀簡潔明了,；質(zhì)控更全1面，結(jié)果更可靠,，設(shè)備體積小巧,，便于搬運和攜帶，可在多種場景下隨心使用,，且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作,，可很大程度避免人為和環(huán)境的污染，降低對檢測環(huán)境的要求,，以及對檢測人員的要求,。更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站,、養(yǎng)殖場等多種使用場景,。

使用平常的抗原試紙做動物診斷常會出現(xiàn)誤診的情況，如用抗原試紙條對剛買的小狗帶到做檢測,，犬瘟試紙條檢測是陰性,，但回家養(yǎng)幾天后小狗開始出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽等癥狀,，此時再去做檢查,，犬瘟檢測則變成陽性，這種情況在寵物臨床上并不少見,。很有可能這只小狗在第,、一次檢查的時候已經(jīng)傳染并且向外排毒了,，但是由于抗原滴度低排毒量比較小，試紙條檢測不出來,，錯失了及早診療的機會,。另一方面，抗體檢測試紙并不能及時準(zhǔn)確知道機體是否傳染這個病原,，就比如現(xiàn)在常見的貓咪弓形蟲檢測,，只有貓咪接觸病原一段時間后，才能產(chǎn)生足量的抗體,，抗體試紙才出現(xiàn)陽性結(jié)果,。當(dāng)這些情況發(fā)生，結(jié)果都是令人很難過的,。因為這不僅*意味著后期要花更多的Money用于診療,，還會出現(xiàn)診療困難，毛孩子們受罪,，甚至?xí)霈F(xiàn)我們都不愿意接受的死亡,。所以我們更建議使用PCR技術(shù)進行臨床診斷。巧亦捷核酸檢測一體機操作非常簡單,，只需要放入樣本就可以了，不需要手工進行核酸提取,，也避免了樣本污染,。

巧亦捷核酸檢測一體機能“穩(wěn)、準(zhǔn),、快”的檢測出禽病,。以犬瘟為例，CDV經(jīng)由鼻,、咽和上呼吸道侵入機體后首先在其附近的淋巴結(jié)和扁挑體中增殖,，動物表現(xiàn)為ZUI初的體溫升高和白細胞減少(主要是淋巴細胞減少)。傳染第,、一周會出現(xiàn)病毒血癥,，通過血液循環(huán)，CDV散布到全身的淋巴器1官,、骨髓和上皮結(jié)構(gòu)的固有膜,，身體的所有分泌物中開始向外排毒。因此在病毒傳染初期是無法在眼鼻分泌物中采集到病毒的,，即便有少量病毒存在,，膠體金試紙板也很難檢測出正確的結(jié)果。這是由于膠體金試紙板上包被的抗體需要和特異抗原結(jié)合后再和預(yù)先包被的二抗結(jié)合才能顯示結(jié)果,，這其中需要的抗原（病毒）量較多,。而PCR檢測是將抗原進行擴增,，只要存在抗原就可以通過特異性引物進行擴增，產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,，可見到預(yù)期大小的DNA條帶出現(xiàn),，從而對病原體的基因組片段作出鑒定。因此,，我們更推薦獸醫(yī)師們使用巧亦捷核酸檢測一體機,。分子診斷技術(shù)大致劃分為PCR技術(shù)、分子雜交,、基因測序,、核酸質(zhì)譜、生物芯片5大類,。蘇州全自動PCR技術(shù)

巧亦捷核算檢測一體機從樣本處理開始,，所有檢測項目可在30-60分鐘完成，自動生成報告,，檢測效率極大提高,。動物用PCR檢測方法

在寵物醫(yī)院，往往沒有專業(yè)的實驗環(huán)境與PCR分區(qū),，樣本中病原體污染,、PCR反應(yīng)后產(chǎn)物污染都是會很影響PCR結(jié)果，導(dǎo)致假陽性的出現(xiàn),，其中PCR產(chǎn)物污染是導(dǎo)致化驗室環(huán)境污染**主要的因素（PCR反應(yīng)中DNA的復(fù)制是指數(shù)級的增長）,。而選擇不善于處理低濃度樣本與復(fù)雜樣本的提取方法，導(dǎo)致核酸提取不完全或者在**1后PCR反應(yīng)中存在抑制物,，污染PCR反應(yīng),，則會導(dǎo)致漏檢，產(chǎn)生假陰性,。這些都是在核酸檢測過程中需要注意的點,。巧亦捷PCR反應(yīng)系統(tǒng)采用磁珠法核酸提取純化加熒光探針PCR方法，整機一體化,，實現(xiàn)一機提取加擴增,，減少人工操作與培訓(xùn)時間，輕松上手,。避免污染,。動物用PCR檢測方法