寵物是我們的家人,每一個(gè)飼主都希望能夠給自己的寶貝比較好的照顧,特別是當(dāng)他們生病的時(shí)候,。每一位醫(yī)生也都希望能夠在**短的時(shí)間內(nèi)找到病因,對(duì)癥下藥,以減少動(dòng)物的痛苦,,盡早痊愈,。只是可惜的是,市面上現(xiàn)有的一些PCR儀器因?yàn)橐韵碌脑?,無(wú)法在寵物的健康照顧上發(fā)揮比較大的功用:1,、設(shè)備昂貴2、操作過(guò)程需要專(zhuān)業(yè)人員3,、需要大空間放置所有設(shè)備4,、PCR檢測(cè)系統(tǒng)(配置PCR試劑體系+PCR儀擴(kuò)增+瓊脂糖凝膠電泳制備+凝膠成像系統(tǒng))(**少4個(gè)小時(shí)的實(shí)驗(yàn)時(shí)間),所以相較于PCR儀器,,寵物醫(yī)院更適合購(gòu)買(mǎi)一臺(tái)全自動(dòng)快速核酸檢測(cè)一體機(jī),。巧亦捷的品牌主張為:用心關(guān)愛(ài)每一個(gè)生命健康,。蘇州寵物PCR核酸檢測(cè)
巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針?lè)ń榻B:TaqMan探針?lè)ㄊ蔷哂懈叨忍禺愋缘亩縋CR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對(duì)PCR引物和一條探針,,探針的5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán),,3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán),探針只與模板特異結(jié)合,,其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間,。當(dāng)探針完整的時(shí)候,報(bào)告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收,,所以?xún)x器搜集不到信號(hào),,隨著反應(yīng)的進(jìn)展,Taq酶遇到探針,,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,,導(dǎo)致報(bào)告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收,產(chǎn)生了熒光信號(hào),,因此信號(hào)的強(qiáng)度就代,、表了模板DNA的拷貝數(shù)。多重PCR動(dòng)物檢疫巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)的靈敏性和特異性上的優(yōu)勢(shì),,像犬貓的呼吸道,、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。
巧亦捷核酸一體機(jī)使用情況:1:懷疑動(dòng)物患有傳染性疾?。篜CR技術(shù)在檢測(cè)傳染病病原方面有很多優(yōu)勢(shì),,特別適用于犬貓傳染性疾病的檢測(cè)。如檢測(cè)疾病處于潛伏期以及臨床尚未有其他合適的檢測(cè)方法時(shí)或一些難以進(jìn)行培養(yǎng)的可疑病原體,,都可以選擇PCR檢測(cè)技術(shù),。:舉例:貓鼻氣管炎是由貓皰疹病毒引起的一類(lèi)貓上呼吸道疾病,當(dāng)貓傳染皰疹病毒后,,會(huì)表現(xiàn)出一系列的上呼吸道癥狀,,醫(yī)師若想診斷該病,即可選擇進(jìn)行貓皰疹病毒PCR檢測(cè),。2,、準(zhǔn)確判斷致病病原體:對(duì)于一些臨床癥狀較為相似的疾病,利用PCR檢測(cè)的高度特異性能夠準(zhǔn)確判斷致病病原體,。舉例:貓皰疹病毒,,杯狀病毒傳染,貓衣原體傳染引起的肺炎,,在臨床上均顯示出相似的上呼吸道癥狀,。由于PCR技術(shù)具有高度特異性,PCR檢測(cè)可以從病原體的核酸水平進(jìn)行識(shí)別,將各種病原區(qū)分開(kāi)來(lái),,實(shí)現(xiàn)真正的精確診斷和對(duì)因診療,。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),,三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù),。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,,第一步,,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,,目的基因作為模板,,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過(guò)80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈,。第二步,,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì),。第三步,引物的延伸,,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),,2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),,2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段,、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬(wàn)倍,,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性,。PCR檢測(cè)普及率越來(lái)越高,PCR檢測(cè)正處于高速發(fā)展階段,,未來(lái)寵物PCR檢測(cè)市場(chǎng)前景良好,。
目前市面上有很多PCR儀器,一時(shí)間讓獸醫(yī)師無(wú)從選擇,,但大多數(shù)都是PCR擴(kuò)增儀,,即需要人工進(jìn)行核酸提取和純化,。他們都有以下痛點(diǎn):1,、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員和場(chǎng)地,有些還需要配置高速離心機(jī),人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導(dǎo)致污染,。2,、人工反復(fù)開(kāi)蓋加入或倒出試劑,容易導(dǎo)致人為和氣溶膠污染,,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確,。因此針對(duì)寵物醫(yī)院來(lái)說(shuō),需要一臺(tái)集核酸提取,、純化和擴(kuò)增為一體的全自動(dòng)核酸檢測(cè)儀,。能更好的控制人工成本及試劑成本。國(guó)外已將PCR技術(shù)廣泛應(yīng)用于犬瘟,、犬細(xì)小,、弓形蟲(chóng)等致病菌的檢測(cè),從根本上突破了免疫學(xué)間接檢測(cè)的局限,。多重PCR動(dòng)物檢疫
PCR通過(guò)樣本中的基因信息進(jìn)行分析,,病原體診斷試劑只會(huì)去捕捉該病原體的基因,并對(duì)其進(jìn)行大量擴(kuò)增,。蘇州寵物PCR核酸檢測(cè)
絕大多數(shù)PCR檢測(cè)的操作分為:樣本采集→樣本處理→核酸提取→上機(jī)檢測(cè)四個(gè)步驟,,在樣本的存放和處理,特別是核酸的提取和擴(kuò)增過(guò)程中,,很容易造成PCR實(shí)驗(yàn)室的污染,,從而造成結(jié)果假陽(yáng)。巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)全自動(dòng)核酸提取,,手工操作時(shí)間極短:將樣本置于薄膜囊袋中進(jìn)行核酸的釋放和擴(kuò)增,,一步直達(dá),短時(shí)間出結(jié)果,。既減少了核酸提取的工作量,,縮短了檢測(cè)時(shí)間,又極大降低了污染發(fā)生的幾率,。**小化人為干預(yù)帶來(lái)的操作誤差,,降低污染的可能性。是市面上自動(dòng)化程度比較高的多重病原體解決方案,。蘇州寵物PCR核酸檢測(cè)