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長沙BD VDJ單細胞轉錄組測序

來源: 發(fā)布時間:2022-07-12

針對單細胞測序數(shù)據(jù)分析時的reads數(shù),、基因表達量及細胞數(shù)量判定過程中:以捕獲5000個細胞,、100G的測序量為標準,每個細胞的reads數(shù)大約在50k左右;每個細胞的基因中位數(shù)取決于樣本的細胞類型,,例如成熟的B,,T,,粒細胞數(shù)量較多的組織中,,由于該類型細胞表達的基因數(shù)普遍較少,導致基因中位數(shù)下降,。而某些疾病組織,、或者體外培養(yǎng)的如干細胞等,他們的基因表達數(shù)較高,甚至可以超過1W,,這就導致該類樣本基因中位數(shù)非常高,。因此,我們對細胞數(shù)量以及基因中位數(shù)確認時,,需要考察實際組織的細胞組成,。豐富的測序和數(shù)據(jù)分析經(jīng)驗,烈冰配套全程個性化,、定制化地數(shù)據(jù)分析服務,。長沙BD VDJ單細胞轉錄組測序

從單細胞測序描述性分析轉向復雜樣本中不同細胞類型的功能解析,越來越需要一種多組學的細胞生物學視角,。通過單細胞多組學——即對不同組學的數(shù)據(jù)集進行分析和整合——科學家能夠從同一個單細胞來源中檢測多種細胞特征,。這些特征包括全轉錄組基因表達、細胞表面蛋白表達,、免疫組庫序列(包括T細胞和B細胞受體)以及用于了解表觀基因組調(diào)控的開放染色質區(qū)域,。隨著單個實驗可提供更多信息豐富的數(shù)據(jù),研究人員的獲益更多,,包括保留珍貴樣本,、提高生產(chǎn)力、減少因批次效應引起的錯誤,,并節(jié)省更多的高科技資源(從資助基金到人員時間),。溫州scRNA單細胞服務機構烈冰全線實驗平臺滿足超深度、大規(guī)模發(fā)現(xiàn)和復雜疾病研究的測序,。

什么時候要用到去死細胞的操作呢,?跟進烈冰生物多年單細胞測序服務經(jīng)驗來看,當細胞懸液進行質量和活性檢測后,,考慮對細胞活性在50%-70%的懸液進行去除死細胞的操作,。而太低活性的懸液(小于30%),懸液中細胞大量死亡,,可能已經(jīng)丟失了原組織內(nèi)的細胞比例和狀態(tài),,失真嚴重,,建議重新收集樣本進行新的實驗,,保證數(shù)據(jù)的高質量和實驗結果的準確性。但需要注意到,,去除死細胞的操作會損失一定的細胞數(shù)量,,因此希望您在提供樣本時,盡可能提供足量的細胞,,以備實驗過程中可能存在的細胞死亡的問題,,BD Rhapsody單細胞捕獲平臺對樣本起始細胞量的要求較低,一般提供10萬個細胞以上均可滿足需求,特殊樣本可詳細咨詢烈冰生物,。

樣本制備后的保存 為了盡可能地減少轉錄組的變化,,在對細胞進行清洗和計數(shù)后,單細胞懸液應當保存于冰上,,直至用于后續(xù)的上機和文庫制備步驟,。在理想狀況下,一旦制備好樣本,,應當在3min鐘內(nèi)將其用于下游步驟,。然而,您還有必要了解各類細胞的不同性質,,因為這可能會影響細胞應在冰上保存的時間,,以及它們在制備后多久便應當被盡快使用。例如,,有些細胞(如PBMC)如果在冰上放置一段時間,,它們就開始形成團塊。這些團塊很難解離,,增加了堵塞的風險,,而且每個團塊被當成單細胞計數(shù),又降低了細胞計數(shù)的準確性,。此外,,有些細胞更加粘稠,形成團塊的速度更快,。對于這些細胞,,必須盡量減少制備和使用之間的時間差。深度的單細胞測序數(shù)據(jù)解讀助力醫(yī)療健康大時代,。

烈冰生信團隊傾情研發(fā)的NovelBrain?生信大數(shù)據(jù)分析平臺,,針對龐大的單細胞測序數(shù)據(jù),能夠實現(xiàn)細胞類型鑒定的快,、精,、準:一鍵導入gene list構建個性化基因列表;輕松一點即可展示Marker基因的Feature plot,;任意修改Cluster的顏色和名稱助力高效鑒定細胞類型,;一鍵獲得t-SNE圖、Heatmap和Violin圖:輕松獲得并下載基因表達的t-SNE圖,、Heatmap,、Violin圖,還可以通過調(diào)節(jié)寬,、高和系數(shù)比例來調(diào)節(jié)美觀,。平臺上線300+task自主分析工具,、50+pipeline工作流模板,幫助烈冰生信分析團隊和自主分析用戶實現(xiàn)分析工具和模板的快速調(diào)用和一站式全流程自動化分析,,節(jié)省工作時間并提升整體工作效率,。截至2022年6月,烈冰助力發(fā)表單細胞測序文章30+篇,。廣州BD VDJ單細胞平臺

個性化制定測序項目方面,,滿足從檢測基因到蛋白的多組學測序要求。長沙BD VDJ單細胞轉錄組測序

相對于Smart-Seq技術在細胞數(shù)量上的問題,,BD平臺普遍提供的細胞數(shù)量都在1000-10000不等的測序細胞量,,特殊研究需求的項目,可提供上限40000個細胞的捕獲量(單個樣本),。這個量級的測序細胞量已經(jīng)可以說能夠完全覆蓋絕大部分組織的Single Cell群體類型,。因此,對于基于基因表達進行準確細胞分型上,,無論是從細胞數(shù)量上來說還是表達檢測可靠性來說,,都會更實用。此外針對特殊項目研究,,如需要捕獲和分析脆弱的細胞,,如粒細胞、中性粒細胞,、CAR-T細胞,、干細胞、移植瘤細胞,、骨髓瘤細胞等,,烈冰生BD平臺也有更好的捕獲效能,滿足您的實際需求,。長沙BD VDJ單細胞轉錄組測序

上海烈冰生物醫(yī)藥科技有限公司位于江月路999號奇亞特中心22幢,,是一家專業(yè)的生物科技、醫(yī)藥科技,、信息科技,、計算機科技領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術服務,、技術轉讓,、技術咨詢,市場營銷策劃,,市場信息咨詢與調(diào)查(不得從事社會調(diào)查,、社會調(diào)研,、民意調(diào)查,、民意測驗),,從事貨物及技術的進出口業(yè)務,計算機,、軟件及耗材(除??兀浖_發(fā)【依法須經(jīng)批準的項目,,經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】公司,。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,,致力于發(fā)展NovelBio,烈冰生物,NovelBrain,PanoCell,烈冰智造的品牌,。公司以用心服務為重點價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,,將生物科技,、醫(yī)藥科技、信息科技,、計算機科技領域內(nèi)的技術開發(fā),、技術服務、技術轉讓,、技術咨詢,,市場營銷策劃,市場信息咨詢與調(diào)查(不得從事社會調(diào)查,、社會調(diào)研,、民意調(diào)查、民意測驗),,從事貨物及技術的進出口業(yè)務,,計算機、軟件及耗材(除??兀?,軟件開發(fā)【依法須經(jīng)批準的項目,,經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】等業(yè)務進行到底,。自公司成立以來,一直秉承“以質量求生存,,以信譽求發(fā)展”的經(jīng)營理念,,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的單細胞測序,,生物大數(shù)據(jù)云分析平臺,,空間轉錄組測序,單細胞多組學測序,,從而使公司不斷發(fā)展壯大,。