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進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-12

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,,用胰酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,,例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),,去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后,,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè),。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá),。PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量

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瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。Thermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑說明書PEI轉(zhuǎn)染試劑用什么溶劑配制?

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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù),,以創(chuàng)新和為價(jià)值理念,通過自身研發(fā)團(tuán)隊(duì),,以及與國(guó)內(nèi)外專業(yè)科研團(tuán)隊(duì)強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合,,不斷創(chuàng)新,為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù),。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,,從工程學(xué)角度在分子、細(xì)胞,、組織,、乃至整個(gè)人體系統(tǒng)多層次認(rèn)識(shí)人體的結(jié)構(gòu)、功能和其他生命現(xiàn)象,,研究用于防病,、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料,、制品,、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱。

線性化聚乙烯亞胺pei25,000,一種高電荷陽(yáng)離子聚合物,非常容易結(jié)合于高電荷陰離子基質(zhì),。工業(yè)應(yīng)用上線性化pei可改善負(fù)電荷染料的物理外觀以調(diào)整染料的化學(xué)特性和增強(qiáng)染料與固相基質(zhì)的黏附能力,常用作黏附增強(qiáng)劑,作用同多聚賴氨酸(poly-lysine);科研應(yīng)用上;線性化pei能與dna或其他負(fù)電荷生物大分子簡(jiǎn)單結(jié)合,正是這一特性,使得成為一種非常行之有效的載體運(yùn)輸介質(zhì)(vector carrier),即轉(zhuǎn)染試劑,。上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團(tuán)公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國(guó)內(nèi)客戶群體,,生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系,,以及高風(fēng)險(xiǎn)生物危險(xiǎn)材料進(jìn)出口平臺(tái)的優(yōu)勢(shì).PEI轉(zhuǎn)染試劑的工作原理是什么,?

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