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線性PEI轉(zhuǎn)染試劑使用說明

來源: 發(fā)布時間:2023-03-08

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,,物理轉(zhuǎn)染和化學轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,,以慢病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,其侵染效率可以達到90%以上,,但常因安全性等問題,,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,,無論哪一種都需要特定的設(shè)備,且一分錢一分貨,,性能好的價格也都很性感,。


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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,選擇PEI,,以至于相當長的時間內(nèi),,轉(zhuǎn)染試驗都不順利。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,順序不可錯,,輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高,。PS:事實證明,,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,??蒲屑塒EI轉(zhuǎn)染試劑說明書哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比高呢?

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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體,,生命科學領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術(shù),,引入中國市場,開發(fā),、孵育和推廣,,致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國,,集中在為細胞/基因領(lǐng)域、/免疫,,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì),轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化

對大多數(shù)細胞來而言,,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格,、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),,細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決,。用PEI轉(zhuǎn)染時,一般和DNA的比例是多少,?

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,,以至于相當長的時間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,,輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當提高,。分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.線性PEI轉(zhuǎn)染試劑使用說明

PEI轉(zhuǎn)染對復(fù)合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間,。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑使用說明

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。





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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司是一家從事血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),,微流控器官芯片,,藍牙無線標簽機研發(fā)、生產(chǎn),、銷售及售后的貿(mào)易型企業(yè),。公司坐落在自由貿(mào)易試驗區(qū)達爾文路16幢104室,成立于2019-02-15,。公司通過創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,,以客戶滿意為重要標準。主要經(jīng)營血小板裂解液,,WB自動孵育系統(tǒng),,微流控器官芯片,藍牙無線標簽機等產(chǎn)品服務(wù),,現(xiàn)在公司擁有一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)設(shè)計團隊,,對于產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)要求極為嚴格,完全按照行業(yè)標準研發(fā)和生產(chǎn),。上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司每年將部分收入投入到血小板裂解液,,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,,藍牙無線標簽機產(chǎn)品開發(fā)工作中,,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用。公司在長期的生產(chǎn)運營中形成了一套完善的科技激勵政策,,以激勵在技術(shù)研發(fā),、產(chǎn)品改進等。上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司嚴格規(guī)范血小板裂解液,,WB自動孵育系統(tǒng),,微流控器官芯片,,藍牙無線標簽機產(chǎn)品管理流程,確保公司產(chǎn)品質(zhì)量的可控可靠,。公司擁有銷售/售后服務(wù)團隊,,分工明細,服務(wù)貼心,,為廣大用戶提供滿意的服務(wù),。