對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司,，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。25K和40K的PEI轉(zhuǎn)染試劑有哪些區(qū)別？PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑常見問題

接種細胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)du jia代理商，更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！線性PEI轉(zhuǎn)染試劑市場報價PEI轉(zhuǎn)染試劑對復(fù)合物孵化的時間是有要求的，一般建議5~20分鐘之間,。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗。當(dāng)初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,，選擇PEI,，以至于相當(dāng)長的時間內(nèi)，轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,，順序不可錯,，輕微混勻，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS：事實證明，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑。

瞬時轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達,。請自行確定適合檢測時間。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！哪個品牌的GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好？廣東PEI轉(zhuǎn)染試劑市場報價

PEI轉(zhuǎn)染試劑主要成分是什么,？PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑常見問題

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,，分子量25000，它能與核酸形成復(fù)合物,，并使該復(fù)合物進入哺乳動物細胞,。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系，如HEK-293,、HEK293T,、HepG2、Hela,、CHO-K1,、COS-1、COS-7,、NIH/3T3和Sf9等,。該試劑即使在有血清存在的情況下，它仍然能的將核酸導(dǎo)入細胞,。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點：優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試,。將eGFP表達質(zhì)粒（GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01）用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞，轉(zhuǎn)染16h后,，超過95%的細胞表達eGFP,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑常見問題

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司主營品牌有PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote,，發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大，該公司貿(mào)易型的公司,。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),，以誠信務(wù)實的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團隊,、踏實的職工隊伍,，努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品,。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠滿意為標(biāo)準(zhǔn),；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo),，提供***的血小板裂解液，WB自動孵育系統(tǒng),，微流控器官芯片,，藍牙無線標(biāo)簽機。曼博生物自成立以來,，一直堅持走正規(guī)化,、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持,。