瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá),。請自行確定適合檢測時(shí)間,。用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因？40KPEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染步驟

對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物,！科研級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格多少美國Polysciences提供化學(xué)PEI轉(zhuǎn)染試劑,。

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團(tuán)公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體,，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系,，以及高風(fēng)險(xiǎn)生物危險(xiǎn)材料進(jìn)出口平臺(tái)的優(yōu)勢，曼博生物嚴(yán)格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗(yàn)證過的產(chǎn)品和技術(shù),，引入中國市場,，開發(fā)、孵育和推廣,，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國,，集中在為細(xì)胞/基因領(lǐng)域、/免疫,，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化,。

上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)du jia代理商,，更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司,，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個(gè)科研領(lǐng)域,。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案,，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。

方法：1．細(xì)胞分盤：通過胰酶消化收集細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,，使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基,。2.制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例,。準(zhǔn)備兩支1.5mL離心管，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中,，混勻,。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲(chǔ)存液稀釋成10μM，充分混合,。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基中,，輕輕搖動(dòng)平皿混勻,，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲(chǔ)存液前都需要先將其充分混勻,，保證所取的濃度一致,。3.培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng),，16h左右可以觀測到報(bào)告基因的表達(dá),。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！用PEI轉(zhuǎn)染時(shí)一般和DNA的比例是多少,？

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá),。上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)du jia代理商，更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀什么原因？陽離子聚合物PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

哪個(gè)品牌的GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好用,？40KPEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染步驟

對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到宜轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化,。40KPEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染步驟

曼博生物，2019-02-15正式啟動(dòng),，成立了血小板裂解液,，WB自動(dòng)孵育系統(tǒng)，微流控器官芯片,，藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)等幾大市場布局,，應(yīng)對行業(yè)變化，順應(yīng)市場趨勢發(fā)展,，在創(chuàng)新中尋求突破,，進(jìn)而提升PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的市場競爭力，把握市場機(jī)遇,，推動(dòng)醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步,。業(yè)務(wù)涵蓋了血小板裂解液，WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),，微流控器官芯片,，藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)等諸多領(lǐng)域，尤其血小板裂解液,，WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),，微流控器官芯片，藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢,，完成了一大批具特色和時(shí)代特征的醫(yī)藥健康項(xiàng)目,；同時(shí)在設(shè)計(jì)原創(chuàng)、科技創(chuàng)新,、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動(dòng)行業(yè)發(fā)展,。我們強(qiáng)化內(nèi)部資源整合與業(yè)務(wù)協(xié)同，致力于血小板裂解液,，WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),，微流控器官芯片，藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)等實(shí)現(xiàn)一體化,，建立了成熟的血小板裂解液,，WB自動(dòng)孵育系統(tǒng)，微流控器官芯片,，藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)運(yùn)營及風(fēng)險(xiǎn)管理體系,，累積了豐富的醫(yī)藥健康行業(yè)管理經(jīng)驗(yàn)，擁有一大批專業(yè)人才,。公司坐落于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,，業(yè)務(wù)覆蓋于全國多個(gè)省市和地區(qū),。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收，進(jìn)一步為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì),、社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻(xiàn),。