探索LIMS在綜合第三方平臺建設(shè)
高校實(shí)驗(yàn)室引入LIMS系統(tǒng)的優(yōu)勢
高校實(shí)驗(yàn)室中LIMS系統(tǒng)的應(yīng)用現(xiàn)狀
LIMS應(yīng)用在生物醫(yī)療領(lǐng)域的重要性
LIMS系統(tǒng)在醫(yī)藥行業(yè)的應(yīng)用
LIMS:實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)的模塊組成
如何選擇一款適合的LIMS?簡單幾步助你輕松解決
LIMS:解決實(shí)驗(yàn)室管理的痛點(diǎn)
實(shí)驗(yàn)室是否需要采用LIMS軟件,?
LIMS系統(tǒng)在化工化學(xué)行業(yè)的發(fā)展趨勢
產(chǎn)品介紹LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效,、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細(xì)胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),,促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,,并有相關(guān)藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點(diǎn)l增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,可高達(dá)90%—提高zhi liao蛋白表達(dá)量,,有利于取得臨床試驗(yàn)成功l減少M(fèi)OI低至2倍,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lentivirus的用量和物料成本l控制單個(gè)細(xì)胞中的病毒載體拷貝數(shù)(VCN,,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)l易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導(dǎo)流程,,兼容已經(jīng)開發(fā)流程l提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗(yàn)的所有必備文件l30多種應(yīng)用LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的藥物已在美國和歐洲進(jìn)入臨床試驗(yàn)(PhaseIII和PhaseI/II)階段——加速了IND文件歸檔慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)是干什么的呢?DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)方案
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個(gè)細(xì)胞gan ran的病毒粒子個(gè)數(shù),,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示,。慢病毒的gan ran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同,因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,,慢病毒gan ran上的可能性也越大,gan ran效率越高,,但對細(xì)胞的毒性也越大,。另外細(xì)胞需要的MOI值越大,也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用,。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)方案慢病毒載體的研究發(fā)展歷程是怎樣的,?
慢病毒gan ran效率受到多種因素的影響,,首先,考慮病毒包裝制備是否存在問題,,比如外源基因是否正確,,病毒滴度是否合格等。其次,,考慮病毒運(yùn)輸和保存方式是否得當(dāng),,解凍病毒一定要在冰上進(jìn)行,避免反復(fù)凍融,否則會影響病毒滴度,;-80℃保存半年以上需要重新測定滴度,。細(xì)胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好,、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率,。
第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個(gè)安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,,使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動子序列,,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,,代之以異源啟動子序列,,這樣原始的HIV基因組中的9個(gè)基因在慢病毒載體中只保留了3個(gè)(gag、pol和rev) ,,因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全,。與第三代系統(tǒng)相比,第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白(在較少的質(zhì)粒上)以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒,。第三代包裝系統(tǒng)不表示tat,,被認(rèn)為比第二代系統(tǒng)更安全,但可能更難使用,,因?yàn)樗鼈冃枰盟膫€(gè)單獨(dú)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染才能產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒,。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是三質(zhì)粒或四質(zhì)粒包裝系統(tǒng),。
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個(gè)細(xì)胞gan ran的病毒粒子個(gè)數(shù),,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒gan ran上的可能性也越大,,gan ran效率越高,,但對細(xì)胞的毒性也越大。另外細(xì)胞需要的MOI值越大,,也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用,。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國和歐洲多個(gè) Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行,。為了達(dá)到研究目的,,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。
目前,CAR-T細(xì)胞主要通過病毒載體制備,,大多數(shù)情況下由慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒做載體,。慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進(jìn)靶細(xì)胞基因組,穩(wěn)定的基因表達(dá)等特點(diǎn),,被認(rèn)為是Zui有希望的基因zhi liao載體,。與其他病毒載體相比,慢病毒載體的整合模式具有更低的致Ai風(fēng)險(xiǎn),,以及隨機(jī)整合基因風(fēng)險(xiǎn)低,,因此,用慢病毒載體生產(chǎn)CAR-T細(xì)胞更加安全有效,,而且靈活,。更重要的是慢病毒相較于其他病毒載體,生產(chǎn)成本相對較低,。另外,,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細(xì)胞,也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細(xì)胞,,因此,,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)更為guang fan的細(xì)胞,包括那些難轉(zhuǎn)導(dǎo)的血液前體細(xì)胞,,神經(jīng)細(xì)胞,,淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,,歡迎咨詢上海曼博生物,!用什么試劑可以做慢病毒轉(zhuǎn)染?TAKARA慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)體系
什么試劑可以提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率呢,?DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)方案
LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效,、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細(xì)胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),,促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,,并有相關(guān)藥物已上市銷售。LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)胞類型,包括CD34+造血干細(xì)胞(HSCs),,間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),,神經(jīng)干細(xì)胞,原代T細(xì)胞,,NK細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等,,對于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細(xì)胞亦有效。已成為改進(jìn)體外基因zhi liao和CAR-T細(xì)胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的理想選擇,。DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)方案