研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導效率,,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響,。這種轉(zhuǎn)導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導效率的潛力,。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導效率也具有很大的影響,,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰,、處于對數(shù)生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率,。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑是用于什么的,?淺談慢病毒轉(zhuǎn)導毒性分析
在病毒附著到宿主細胞后,病毒RNA滲透進宿主細胞,,并以此為模板,,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,RNA的兩端都進行了復制,,產(chǎn)生了長末端重復序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi),。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,,稱為原病毒。原病毒在細胞周期過程中復制,,然后傳遞給子細胞,。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細胞,,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao,。Zuihou,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細胞質(zhì)中,。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜,。在出芽過程中,病毒蛋白被病毒蛋白酶裂解,,產(chǎn)生成熟的ganranxingbing毒粒子,。慢病毒轉(zhuǎn)導可使用LentiBOOST產(chǎn)品。更多關于慢病毒轉(zhuǎn)導的相關產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!慢病毒轉(zhuǎn)導工藝有什么可以增加慢病毒轉(zhuǎn)導的嗎?
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效,、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高轉(zhuǎn)導效率。在病毒附著到宿主細胞后,,病毒RNA滲透進宿主細胞,,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,,RNA的兩端都進行了復制,,產(chǎn)生了長末端重復序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi),。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒,。原病毒在細胞周期過程中復制,,然后傳遞給子細胞。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,,慢病毒可以有效地gan ran不分裂的細胞,,這使它們更有吸引力用于基因zhi liao。
對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞,,如原代細胞,、干細胞、不分化的細胞等,,使用慢病毒載體,,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導效率,且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率da da增加,,能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因的長期,、穩(wěn)定表達。SIRION Biotech 的首席執(zhí)行官 Christian Thirion 博士說,,SIRION 的貢獻是優(yōu)化病毒載體基因的轉(zhuǎn)導,,從而在zhi liao患者中獲得更高的轉(zhuǎn)導效率和長期的基因表達。此外,,通過降低生產(chǎn)細胞產(chǎn)品所需的慢病毒載體的數(shù)量,,使用諸如 LentiBOOST 之類的轉(zhuǎn)導增強劑有助于降低生產(chǎn)成本。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,用于臨床前和臨床應用,。什么是慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑呢?
產(chǎn)品特點1.增強慢病毒轉(zhuǎn)導效率,,可高達90%—提高zhi liao蛋白表達量,有利于取得臨床試驗成功2.減少MOI低至2倍,,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lentivirus的用量和物料成本3.控制單個細胞中的病毒載體拷貝數(shù)(VCN,,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標準4.易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導流程,,兼容已經(jīng)開發(fā)流程5.提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗的所有必備文件6.30多種應用LentiBOOST的藥物已在美國和歐洲進入臨床試驗(PhaseIII和PhaseI/II)階段——加速了IND文件歸檔。更多LentiBOOST相關產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章:Mine-bio什么增強慢病毒轉(zhuǎn)導的效率?慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
慢病毒轉(zhuǎn)導是干什么的呢?淺談慢病毒轉(zhuǎn)導毒性分析
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導可誘導長期轉(zhuǎn)基因表達,,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望,。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導效率的試劑,但它未被批準用于人體,,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化,。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的,。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導增強劑,,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),且很容易應用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導方案,,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導研究,。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導,。更多關于慢病毒轉(zhuǎn)導相關產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!淺談慢病毒轉(zhuǎn)導毒性分析