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抗體表達PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于293細胞轉(zhuǎn)染

來源: 發(fā)布時間:2023-12-04

1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加,!?如何優(yōu)化PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時的比例,?抗體表達PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于293細胞轉(zhuǎn)染

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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑,。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,,在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,,可靠性強,。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段,。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物,。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險,。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn),。如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!四川申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好?

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準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染3h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加,!?

接種細胞:轉(zhuǎn)染前,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑,,歡迎咨詢曼博生物,!想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時,,一般和DNA的比例是多少呢?

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產(chǎn)品簡介:Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES無菌過濾器,,完全消除支原體污染風險,。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,,并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,,有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,,可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲(SF9,、SF21) 等真核細胞系,,可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間,,加快項目進度。經(jīng)過嚴格的性能檢測,,確保品質(zhì),,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。產(chǎn)品特點:非GMP,研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液,;高轉(zhuǎn)染效率,;無縫過渡到MAXgene GMP;易放大,,可預測產(chǎn)量,;用于工藝開發(fā),臨床前和早期臨床研究,。如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.福建PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適合新手快速上手

哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比高?抗體表達PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于293細胞轉(zhuǎn)染

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加!抗體表達PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于293細胞轉(zhuǎn)染