材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4,，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆谩７椒ǎ?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加,！?有哪些不錯的PEI轉染試劑品牌,？經濟高效PEI轉染試劑試用裝試用

接種細胞：轉染前,，用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管。轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時間,。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！近期還可申請PEI轉染試劑試用裝！貼壁細胞PEI轉染試劑試用裝轉染步驟線性的和分支的PEI轉染試劑哪個好,？

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準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！?哪個品牌的PEI轉染試劑比較好,？貼壁細胞PEI轉染試劑試用裝轉染步驟

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1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。?如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！?經濟高效PEI轉染試劑試用裝試用