產(chǎn)品簡介：Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成,，采用0.1um PES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,，這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO、COS,、HELA,、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度,。經(jīng)過嚴格的性能檢測,，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP,，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率,；無縫過渡到MAXgene GMP,；易放大，可預測產(chǎn)量,；用于工藝開發(fā),，臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染HEK293系列,。可支持IND申報PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可在哪里申請

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌,、或支原體污染,。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物,！?如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！?細胞轉(zhuǎn)染PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝有使用說明嗎哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好,？

接種細胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多PEI相關(guān)產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES,，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！?PEI轉(zhuǎn)染試劑是線性的好還是分支的好？

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑,，歡迎咨詢上海曼博生物,！?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,，即可參加！?誰知道Polysciences的轉(zhuǎn)染試劑怎樣,？液體PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝低成本的選擇

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瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示，每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物,。轉(zhuǎn)染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達,。請自行確定檢測時間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！可支持IND申報PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可在哪里申請