對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化,。?如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!?PEI轉染試劑是線性的好還是分支的好?PEI MAXPEI轉染試劑試用裝free申請
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,,大量科學家選擇PEIMAX,,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,,可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑,,適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段,。Transporter5轉染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,,采用0.1μmPES無菌過濾器,,完全消除支原體污染風險。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝,,請關注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加,!四川全球PEI轉染試劑試用裝PEI轉染試劑的殘留檢測方法怎么開發(fā)呢?
美國Polysciences成立于1961年,,是一家歷史久遠的化學品制造公司,產(chǎn)品guang fan應用于各個科研領域,。Polysciences在聚乙烯亞胺轉染試劑(PEI轉染試劑)的制造工藝上具有長達20多年的經(jīng)驗,,其經(jīng)典的PEI轉染試劑產(chǎn)品系列包括研究級產(chǎn)品PEI 25K,PEI MAX和Transporter 5,,以及cGMP級MAXgene GMP,,被guang fan用于抗體藥物和重組蛋白,臨床等級慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn),,為全球客戶提供成本效益高,、供應穩(wěn)定和質(zhì)量可靠的選擇。在過去10年間,,Polysciences的PEI轉染試劑已被用于國內(nèi)外多項臨床申報,。如想申請PEI試用裝,,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!
對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。更多關于Polysciences PEI相關內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,!如想申請PEI試用裝,,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!?哪里有賣GMP等級的PEI轉染試劑?
穩(wěn)定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。23966-1和24765-1的PEI轉染試劑在哪里買呢?非脂質(zhì)體PEI轉染試劑試用裝申請
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準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物,。轉染3h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關于Polysciences PEI相關內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,!如想申請PEI試用裝,,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!?PEI MAXPEI轉染試劑試用裝free申請