美國Polysciences成立于1961年,，是一家歷史久遠的化學品制造公司，產品guang fan應用于各個科研領域,。Polysciences在聚乙烯亞胺轉染試劑（PEI轉染試劑）的制造工藝上具有長達20多年的經驗，其經典的PEI轉染試劑產品系列包括研究級產品PEI 25K,，PEI MAX和Transporter 5,，以及cGMP級MAXgene GMP，被guang fan用于抗體藥物和重組蛋白,，臨床等級慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產,，為全球客戶提供成本效益高,、供應穩(wěn)定和質量可靠的選擇。在過去10年間,，Polysciences的PEI轉染試劑已被用于國內外多項臨床申報,。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！用PEI轉染試劑時,，一般和DNA的比例是多少呢?四川PEI轉染試劑試用裝測試

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物!?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！?四川PEI轉染試劑試用裝測試MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑,。

接種細胞：轉染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物,！

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！?PEI試用裝在哪里可以申請,？

接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI轉染試劑,，歡迎咨詢曼博生物,！想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！Polysciences PEI轉染試劑中國代理商是哪個？山東PEI轉染試劑試用裝歷史悠久

Transporter 5轉染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉染試劑（PEI）衍生物,。四川PEI轉染試劑試用裝測試

材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES,，調pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！?四川PEI轉染試劑試用裝測試