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上海低成本PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-02-06

抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,,包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化,;以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),,以此希望幫助國內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來的技術(shù)紅利,,終為細(xì)胞,、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能!更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,。???如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加!?25K和40K的PEI轉(zhuǎn)染試劑有哪些區(qū)別,?上海低成本PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

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產(chǎn)品簡介:Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳原子,,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。有實(shí)驗(yàn)證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966(PEI25K)轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良,。產(chǎn)品特點(diǎn):適用于生產(chǎn)mABs,、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV,、LV,、BEV),;在HEK293、CHO和Sf9細(xì)胞系中高度有效,;適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段,;可預(yù)測,可大規(guī)模生產(chǎn),;兩周內(nèi)即可生成大量目標(biāo)蛋白或病毒;高轉(zhuǎn)染效率,;大量已發(fā)表的文獻(xiàn)支持,。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加!上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝歷史悠久有哪些品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑呢?

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對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-Bio?????,。如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加,!?

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接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,,即可參加!PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒有毒性,?上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于293細(xì)胞轉(zhuǎn)染

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細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,,物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,,其侵染效率可以達(dá)到90%以上,但常因安全性等問題,,很多實(shí)驗(yàn)室對其敬而遠(yuǎn)之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,,無論哪一種都需要特定的設(shè)備,,且一分錢一分貨,性能好的價(jià)格也都相對較高,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑,,歡迎咨詢上海曼博生物!?如想申請PEI試用裝,,請關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加,!?上海低成本PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝