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核酸PEI轉染試劑殘留檢測方法

來源: 發(fā)布時間:2024-05-31

線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,,它能與核酸形成復合物,,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,,如HEK-293,、HEK293T、HepG2,、Hela,、CHO-K1、COS-1,、COS-7,、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,,它仍然能的將核酸導入細胞,。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉染試劑均經(jīng)過轉染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,,轉染16h后,,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,。哪個品牌的PEI轉染試劑比較好?核酸PEI轉染試劑殘留檢測方法

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細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染,。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,,其侵染效率可以達到90%以上,,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,,且一分錢一分貨,,性能好的價格也都相對較高。近期還有PEIfree申請活動,,歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關鍵詞“申請PEI”,即可參加活動,!更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!國產(chǎn)PEI轉染試劑品牌Polysciences PEI和Polyplus的PEI哪個更好,?

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對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio

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1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。若想咨詢更多關于PEI轉染試劑相關信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注公眾號Mine-bio回復“PEI申請”申請試用裝,!用PEI轉染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀,?核酸PEI轉染試劑殘留檢測方法

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PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗。當初試驗經(jīng)費很有限,,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,以至于相當長的時間內(nèi),,轉染試驗都不順利,。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉染時,,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,輕微混勻,,靜止20min3.轉染后4小時,,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當提高,。PS:事實證明,PEI是可行的,,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,。更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio ,,私信回復關鍵詞“PEI申請“即可申請PEI試用裝!核酸PEI轉染試劑殘留檢測方法