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注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)),。如有可能,,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌,、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng),,歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“申請(qǐng)PEI”,,即可參加活動(dòng),!更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物,!
對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-BioPEI轉(zhuǎn)染試劑在使用時(shí)出現(xiàn)沉淀的原因是什么?
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的研究手段,,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,,物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見(jiàn),,其侵染效率可以達(dá)到90%以上,但常因安全性等問(wèn)題,,很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,,無(wú)論哪一種都需要特定的設(shè)備,且一分錢一分貨,性能好的價(jià)格也都相對(duì)較高,。近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng),,歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“申請(qǐng)PEI”,,即可參加活動(dòng),!更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!哪里有賣GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑,?PEI轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書
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