注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量：請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能,，請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌,、或支原體污染,。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞,。如想申請(qǐng)PEI試用裝，歡迎關(guān)注公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)“申請(qǐng)PEI”，即可參加,！用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因,？40KPEI轉(zhuǎn)染試劑生產(chǎn)商

對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到宜轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化,。更多產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！福建PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價(jià)比比較高,？

抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化；以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫(kù)定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),，以此希望幫助國(guó)內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),，分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來(lái)的技術(shù)紅利，終為細(xì)胞,、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能,！若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關(guān)注公眾號(hào)Mine-bio回復(fù)“PEI申請(qǐng)”申請(qǐng)?jiān)囉醚b,！

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio ,，私信回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)“即可申請(qǐng)PEI試用裝,！用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)，一般和DNA的比例是多少?

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn),。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,，被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000，選擇PEI,，以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi),，轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn)：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書,，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中，順序不可錯(cuò),，輕微混勻,，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí)，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選，建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS：事實(shí)證明,，PEI是可行的，已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio ,，私信回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)“即可申請(qǐng)PEI試用裝！哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好,？CHO細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

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