穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉(zhuǎn)染試劑適用于針對293和CHO細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染,。山東iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化,。若有更多關(guān)于Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)技術(shù)問題，歡迎咨詢上海曼博生物,。歡迎關(guān)注曼博生物公眾號：Mine-biocGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)化方案有誰用過Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑,？

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,，后續(xù)購買請認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。

產(chǎn)品簡介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO,、COS、HELA,、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進(jìn)度,。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測,，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑,，歡迎咨詢上海曼博生物,！PEI轉(zhuǎn)染試劑的使用方法是怎樣的？

抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì),，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化,；以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn)，以此希望幫助國內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),，分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來的技術(shù)紅利,，終為細(xì)胞、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個生命科學(xué)行業(yè)賦能,！若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉(zhuǎn)染試劑如何溶解和配置,？線性PEI轉(zhuǎn)染試劑說明書

PEI轉(zhuǎn)染試劑在使用時出現(xiàn)沉淀的原因是什么?山東iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風(fēng)險,。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO,、COS、HELA,、昆蟲（SF9,、SF21） 等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進(jìn)度,。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測,，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點(diǎn)：非GMP,，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液,；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgene GMP,；易放大,，可預(yù)測產(chǎn)量,；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究,。山東iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑