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Thermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法

來源: 發(fā)布時間:2025-05-10

PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,,可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產(chǎn)品,,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,,每相隔二個碳原子,,即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉(zhuǎn)染試劑,。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑,。多年以來,,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng),。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系,,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比,,使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本(部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本),。更多PEI MAX相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!PEI轉(zhuǎn)染試劑從96孔板到1000L生物反應(yīng)器規(guī)模都能提供連續(xù)性的高表達(dá)蛋白或病毒,。Thermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法

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對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,,相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,,后續(xù)購買請認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!Thermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法有誰用過Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑,?

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PEIMAX-----高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已大量應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉(zhuǎn)染試劑,。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑,。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,,在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,,可靠性強(qiáng),。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度,。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比,,使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本(部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本)。

對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-Bio.PEI轉(zhuǎn)染試劑和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的區(qū)別?

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,,0.2μm濾膜過濾,,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,,加入20ml1M的HEPES,,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤:通過胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%),。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,,歡迎咨詢上海曼博生物。用PEI轉(zhuǎn)染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀,?In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑說明書

PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時候有什么注意事項(xiàng),?Thermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法

產(chǎn)品特點(diǎn):PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化),;2.鹽酸鹽形式,,具更高的水溶特性;3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,,以固體粉末形式提供,,需用戶自行配置(詳情見使用方法)?;蛘哧P(guān)注我們的公眾號:Mine-bioThermo FisherPEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法