穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,。RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達,。請自行確定檢測時間,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物！RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣PEI轉(zhuǎn)染試劑是不是可以保存在4度,？

抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化,；以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn)，以此希望幫助國內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),，分享研發(fā)工具進步帶來的技術(shù)紅利,，終為細(xì)胞、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個生命科學(xué)行業(yè)賦能,！更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細(xì)胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆谩７椒ǎ?．細(xì)胞分盤：通過胰酶消化收集細(xì)胞,，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細(xì)胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基,。歡迎咨詢上海曼博生物。有人知道PEI轉(zhuǎn)染試劑的價格么,？

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,，后續(xù)購買請認(rèn)準(zhǔn)備新品牌,。PEI轉(zhuǎn)染試劑的主要分子量是多少？SigmaPEI轉(zhuǎn)染試劑

優(yōu)化配方,，PEI轉(zhuǎn)染試劑減少細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng),，保護細(xì)胞活性。RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌,、或支原體污染,。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞,。歡迎關(guān)注曼博生物公眾號：Mine-bioRNAPEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣