上海楚知代理的常州天地人和試劑,,GST(標簽)蛋白親和純化產(chǎn)品可以純化各種表達系統(tǒng)融合表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的目的蛋白,,谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,,Glutathione Beads ,Glutathione Beads 4FF 是通過12個原子的間隔臂,,用化學方法共價結(jié)合了還原型谷胱甘肽制作而成,,這種特別涉及使樹脂的純化效率得到了提高, GSTPur Glutathione Kit提供了3ml Glutathione Beads重力預裝柱,,GST標簽蛋白純化所需的緩沖液,,方便客戶使用,,操作簡單,純化率高預制膠的使用注意事項,。河南定制試劑規(guī)格
抗體純化磁珠 1.抗體純化磁珠試劑盒是否可以重復使用,? 答:不推薦重復使用,不同樣本之間容易造成污染,。 2.若體系中含有木瓜蛋白酶,,是否影響磁珠的使用? 答:木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶,,目前對protein A的影響未知,,建議客戶慎用。 3.1mL抗體純化磁珠能夠用多少次? 答:1mL磁珠能夠結(jié)合1.5-2.0mg抗體,,客戶需要根據(jù)結(jié)合抗體的量來確定使用磁珠的量,。 4.試劑盒中的緩沖液用完后,能否告知配方,? 答:試劑盒中緩沖液的成分都是保密的,。可以采用以下的緩沖液進行替代,。 結(jié)合緩沖液:PBST 150mM PBS,,150mM NaCl,0.1% (v/v) Tween-20,,pH7.2 洗脫緩沖液:甘氨酸緩沖液 0.1M Glycine,,0.1% (v/v) Tween-20,pH2.5(該緩沖液適合于耐酸性的抗體),。 0.1M Glycine,,3M MgCl2 (4M protein A/G) ,0.1% (v/v) Tween-20,,pH4.5(該溶液含較高濃度的鹽,,不可直接進行SDS-PAGE,??梢杂猛肝龌虺瑸V的方法去除過多的鹽)。 保存緩沖液: 50mM Tris-HCl,,0.1%(v/v) Tween-20,,0.01%(w/v) NaN3,pH7.5 洗滌緩沖液: 50mM Tris-HCl,,0.1%(v/v) Tween-20,,pH7.5) 再生緩沖液: 1% (v/v) TritonX-100 上海蛋白檢測試劑代理銷售價格上樣體積30-50ml 怎么選擇脫鹽柱?
蛋白純化試劑抗體純化rProteinA/GBeads4FF純化流程:2.4.1抗體吸附1)取適量的rProteinA/GBeads4FF加入到2ml離心管中,,800rpm離心1min,,吸棄上清,。2)加入0.5ml平衡液,懸浮填料(使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,,起到保護蛋白的作用),,800rpm離心1min,吸棄上清,。再重復兩次,。3)向步驟2)平衡的填料中加入抗體溶液,懸浮填料,,室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,,約30min后,800rpm離心1min,,收集上清液,,留待檢測。4)向3)的填料中加入0.5ml的洗雜液,,懸浮填料,,進行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,,800rpm離心1min,,吸棄上清。再重復兩次,。2.4.2抗體交聯(lián)(備選)如果需要將抗體和目標抗原復合物共同洗脫,,請忽略本步驟,直接進行2.4.3,。50ul-1ml填料量均可以按照以下步驟操作,,無需額外增加交聯(lián)液體積。1)向清洗過的填料中加入1ml交聯(lián)液,,800rpm離心1min,,吸棄上清。2)再向其中加入1ml含20mMDMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)的交聯(lián)液,,此試劑需要現(xiàn)用現(xiàn)配,,懸浮填料,在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,,促使緩沖液和填料充分接觸,,約30min后,800rpm離心1min,,吸棄上清,。
蛋白純化試劑抗體純化rProtein A/G Beads 4FF純化流程,樣品準備上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強度和pH值,,可以用平衡/洗雜液對血清樣品,、腹水或細胞培養(yǎng)液稀釋,,或者樣品用平衡/洗雜液透析。對于100mm培養(yǎng)皿中的貼壁細胞,,吸除細胞培養(yǎng)液,,使用預冷PBS洗滌一次后加入2ml細胞裂解液裂解細胞。對于懸浮細胞,,離心收集細胞后,,PBS洗滌一次后參考貼壁細胞的裂解方法進行裂解。植物或動物組織樣品可以使用液氮研磨方法裂解,。具體的裂解方法請參考不同裂解液的使用說明,,裂解液**終總蛋白濃度選擇在0.5-1μg/μl范圍內(nèi)較為合適。通常針對目標蛋白的表達量不同,,需要對總蛋白濃度進行預實驗調(diào)整,。2.3.去除非特異性結(jié)合(可省略)1)取200微升至1毫升蛋白樣品,加入約1微克和免疫沉淀時使用的IgG種屬相同的3/5常州天地人和生物科技有限公司NormalIgG和20微升充分重懸的rProteinA/GBeads4FF,,4℃緩慢搖動30分鐘,。2)2500rpm(約1000g)離心1分鐘,取上清用于后續(xù)的免疫沉淀,。注:哺乳動物細胞內(nèi)有多種成分可以和IgG發(fā)生結(jié)合,,可能會在后續(xù)免疫印跡中出現(xiàn)非特異性條帶。使用normalIgG和rProteinA/GBeads4FF對裂解液預處理可以降低非特異性吸附,。常見的蛋白質(zhì)分離純化方法,。
麥芽糖結(jié)合蛋白標簽(MBP-tag)蛋白親和純化介質(zhì):麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標簽,分子量約為42000Da,,使用MBP標簽往往可以促進連接蛋白的正確折疊,,增加蛋白的表達水平,并使目標蛋白具有更高的可溶性,,天地人和Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標簽蛋白的親和介質(zhì)層析,,可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進行溫和洗脫,,保護了標簽蛋白的活性,,如果要去除MBP融合部分可用位點特異性蛋白酶切除,以上試劑信息由天地人和銷售商上海楚知提供質(zhì)粒抽提試劑盒Plasmid Purification MaxiPrep Kit,。江蘇核酸提取試劑生產(chǎn)商
天地人和重力柱怎么樣裝柱,?河南定制試劑規(guī)格
蛋白純化試劑,,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),,在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,,約15min后,,800rpm離心1min,再吸棄上清,。4)加入0.5ml的洗雜液,,懸浮填料,進行清洗,,800rpm離心1min,,吸棄上清。再重復兩次,。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,,使抗原與抗體充分結(jié)合,,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原復合物進行離心,,800rpm離心1min,,收集上清液,置于冰上以備后續(xù)檢測,。向離心管中加入1ml洗雜液,,用移液器輕輕吹打使填料-抗體-抗原復合物均勻分散,然后進行離心分離,,800rpm離心1min,,棄上清液。再重復洗滌兩次,。***加入1ml洗雜液,,用移液器將填料-抗體-抗原復合物懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中,并進行離心分離,,800rpm離心1min,,棄上清液河南定制試劑規(guī)格
上海楚知生物科技有限公司主要經(jīng)營范圍是機械及行業(yè)設(shè)備,擁有一支專業(yè)技術(shù)團隊和良好的市場口碑,。公司業(yè)務(wù)涵蓋知楚搖床,,博旅發(fā)酵罐,小動物發(fā)光成像,,ATS高壓均質(zhì)機等,,價格合理,品質(zhì)有保證,。公司注重以質(zhì)量為中心,,以服務(wù)為理念,秉持誠信為本的理念,打造機械及行業(yè)設(shè)備良好品牌,。在社會各界的鼎力支持下,,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗,,為客戶成功提供堅實有力的支持,。