超濾離心管使用注意事項(xiàng)：當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液,，加入10ul流穿，看有沒(méi)變藍(lán)色,，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白,。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開(kāi)始超濾,。要精確判斷是否漏管,，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿,，跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱）,，直到所有濃縮液都加完為止,。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管,。若發(fā)生沉淀,，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適,；前者可用多根超濾管同時(shí)超濾,，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液,，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止,。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免污染和交叉?zhèn)鞑ィ?duì)設(shè)備進(jìn)行徹底清潔消毒,。上海再生纖維素離心管廠家

超濾離心管只需5到15分鐘,，即可對(duì)50到500L樣本進(jìn)行簡(jiǎn)便、可靠的濃縮與脫鹽處理：快速處理樣本,。通常,，回收率高于90％；備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇,。對(duì)應(yīng)各種截留分子量,，備有各種編碼以供輕松識(shí)別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯,。超聲焊接密封,，防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子,。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,，不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的,。雖然PES材料使非特異吸附較小化,，但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問(wèn)題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同,。北京外泌體超濾離心管廠家電話超濾離心管還可以用于濃縮樣品,，減少其體積并提高濃度。

超濾離心管,，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜,、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,，可根據(jù)不同要求靈活選用,；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可將離心管放入離心機(jī)反甩,，將濃縮液甩入回收帽中,，加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收,；截留分子量普遍,，配有3K、5K,、10k,、30K、50K,、100K,、300K、1000K,、0.2μl的聚醚砜膜,；新推出產(chǎn)品膜2K型,，具有極低的蛋白吸附特性,，高流速,、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜,。用以濃縮蛋白,，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾）,，再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次,，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況,。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的,。

超濾作為一種膜分離技術(shù),，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,，其原理是溶液在力的作用下,，通過(guò)超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來(lái),，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過(guò)膜,，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速,、高效,，可同時(shí)濃縮和純化分子,。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）,。2. 將帶蓋過(guò)濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來(lái)平衡,。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí)，將薄膜面板朝上定位,，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘,。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),，在過(guò)濾裝置的底部插入一個(gè)移液管，通過(guò)左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離,，以保證總回收率,。超濾液可貯存在離心管中。說(shuō)明：為達(dá)到較佳回收率,，離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。超濾離心管可以用于檢測(cè)樣品中的蛋白質(zhì),、碳水化合物等有機(jī)分子,。

超濾離心管的分子量選擇：按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,，為了得到較高的收率,，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,，不超過(guò)目標(biāo)分子量的一半,。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,，膜上的孔并非均勻,，離心高壓下也可能滲漏，因此截留孔徑越小,，流速越慢但截留比例更大,。如果樣本濃度低體積大，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心,。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì)，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,，重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間或者過(guò)速離心，雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),，可避免過(guò)度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過(guò)度濃縮,，體積越小，越容易因表面吸附而損失得率,。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,，必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附,，能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面,。超濾離心管在臨床診斷中也具有重要作用，如腎功能檢測(cè),、腦脊液分析等領(lǐng)域。上海再生纖維素離心管廠家

使用超濾離心管時(shí)要注意控制轉(zhuǎn)速,，以避免過(guò)度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品,。上海再生纖維素離心管廠家

超濾離心管應(yīng)用：1、組成部分：該裝置包括一個(gè)蓋子,、一個(gè)過(guò)濾器和一個(gè)50ML的離心管。2,、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意：為了避免在離心過(guò)程中損壞裝置,，在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙,。 3、帶有200微升(μL)的移液管,，用于濃縮液回收適用性。①注意：該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,，只供一次使用，保質(zhì)期3年,。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性，建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn),。4,、濃縮含有抗原,、抗體,、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本),、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本,。5,、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分，從反應(yīng)混合液中去除引物,、連接或分子標(biāo)記,，在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。上海再生纖維素離心管廠家

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