超濾離心管使用注意事項：當(dāng)濃縮到剩下1ml時,，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿,，看有沒變藍色,，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾,。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min,，再取流穿,，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作,，防止蛋白受熱）,，直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,，導(dǎo)致堵管,。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因,，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適,；前者可用多根超濾管同時超濾,，降低濃度的辦法解決,，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止,。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免污染和交叉?zhèn)鞑?，并對設(shè)備進行徹底清潔消毒。上海再生纖維素離心管廠家

超濾離心管只需5到15分鐘,，即可對50到500L樣本進行簡便,、可靠的濃縮與脫鹽處理：快速處理樣本。通常,，回收率高于90％,；備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇,。對應(yīng)各種截留分子量,，備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,，防止側(cè)流或密封不嚴,。適用于配合1.5mL試管的標準離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,，但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題,。非特異結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。北京外泌體超濾離心管廠家電話超濾離心管還可以用于濃縮樣品,，減少其體積并提高濃度,。

超濾離心管，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜,、三醋酸纖維素,、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用,；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收,，又可將離心管放入離心機反甩，將濃縮液甩入回收帽中,，加蓋保存,。這兩種方法都可使?jié)饪s液達到近乎完全回收；截留分子量普遍,，配有3K,、5K、10k,、30K,、50K、100K,、300K,、1000K、0.2μl的聚醚砜膜,；新推出產(chǎn)品膜2K型,，具有極低的蛋白吸附特性，高流速,、高通量,，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,，如果要換Buffer,，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右,，連續(xù)三次,，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul,，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況,。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上,，基本上可以達到換buffer的目的,。

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮,、脫鹽和緩沖液置換,，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾,，大分子量的顆粒被截留下來,，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,，從而達到濃縮,、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點是操作簡便,、快速,、高效，可同時濃縮和純化分子,。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡,。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘,。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),，在過濾裝置的底部插入一個移液管,，通過左右掃動的方式將樣品抽離，以保證總回收率,。超濾液可貯存在離心管中,。說明：為達到較佳回收率，離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品,。超濾離心管可以用于檢測樣品中的蛋白質(zhì),、碳水化合物等有機分子,。

超濾離心管的分子量選擇：按照樣品量和目標分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管，為了得到較高的收率,，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,，不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,，膜上的孔并非均勻,，離心高壓下也可能滲漏，因此截留孔徑越小,，流速越慢但截留比例更大,。如果樣本濃度低體積大，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心,。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心，重復(fù)2次可除去99%鹽,。避免過長時間或者過速離心,，雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計，可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附,。避免過度濃縮,，體積越小，越容易因表面吸附而損失得率,。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,，必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附,，能提高回收率,。盡量避免Tips接觸膜表面。超濾離心管在臨床診斷中也具有重要作用,，如腎功能檢測,、腦脊液分析等領(lǐng)域。上海再生纖維素離心管廠家

使用超濾離心管時要注意控制轉(zhuǎn)速,，以避免過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品,。上海再生纖維素離心管廠家

超濾離心管應(yīng)用：1、組成部分：該裝置包括一個蓋子,、一個過濾器和一個50ML的離心管,。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座,。①注意：為了避免在離心過程中損壞裝置,，在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。 3,、帶有200微升(μL)的移液管,，用于濃縮液回收適用性,。①注意：該產(chǎn)品未經(jīng)消毒，只供一次使用,，保質(zhì)期3年,。為確保對預(yù)定用途的適用性，建議進行初步的回收和截留試驗,。4,、濃縮含有抗原、抗體,、酶,、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物,、洗出液和凈化樣本的生物樣本,。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,，從反應(yīng)混合液中去除引物,、連接或分子標記，在HPLC之前去除蛋白質(zhì),。上海再生纖維素離心管廠家

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