超濾離心管使用注意事項:(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,,比如目的蛋白分子量為35kDa,,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,,則可以用截留分子量3kD的超濾管,。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同,。2)新買來的超濾是干燥的,,使用前加入超純水,水量完全過膜,,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘,。然后將水倒出,即可加入蛋白液,,加入的多少,,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,,加入蛋白液前,,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡,。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡,。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜,。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度),。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,,有所不同。離心機的加速度調(diào)至較低檔,,減小對膜的壓力,。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,,方可離開離心機,,否則離心機出問題時,無法一時間處理,。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直),。在實際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,,這樣可以延長離心管的使用壽命,。超濾離心管還可用于檢測食品樣品中的致病菌、重金屬等污染物,,并進行食品安全監(jiān)測和控制,。舟山離心管排行榜
超濾離心管的原理:根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘,。超濾膜的垂直設(shè)計也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失,。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實現(xiàn)高效回收,。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原,、抗體、酶,、核酸(DNA/RNA樣本,,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分,,去除反應(yīng)液中的引物,、接頭或分子標記,在HPLC前去除蛋白質(zhì),。3)除鹽,,緩沖液更換,或滲濾,。成都超濾離心管工廠超濾離心管適用于從細胞培養(yǎng)基,、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì),、核酸,、多糖等大分子化合物。
超濾離心管,,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜,、三醋酸纖維素,、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用,;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,,加蓋保存,。這兩種方法都可使?jié)饪s液達到近乎完全回收;截留分子量普遍,,配有3K,、5K、10k,、30K,、50K、100K,、300K,、1000K,、0.2μl的聚醚砜膜,;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,,高流速,、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜,。用以濃縮蛋白,,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),,再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況,。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的,。
超濾離心管可以滅菌嗎,?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,,否則會變形,,不論是是密理博,、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當干燥保存,,買回來的時候就是干的,。當然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當保存在20%的乙醇中,,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜,。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜,。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀,。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管在藥物代謝動力學研究中也具有重要意義,,以確定藥物代謝途徑和藥效學參數(shù),。
我用的是3500g,4度離心,,時間可以自己控制,,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右,。千萬別一下離心時間太長,,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,,有的則一下子就好,。當然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,,還有蛋白的濃度有關(guān)系,。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,,甚至形成沉淀就得不償失了,。另外其實他們的管子都設(shè)計的是一次性使用,所以如果想重復(fù)使用,,不要離得速度太高,,4000-4500RPM就差不多了,另外重復(fù)使用時要看看管壁上有沒有裂紋,,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實了,。使用超濾離心管時,應(yīng)注意保持樣品干燥,、無污染和清潔,。蘇州3K超濾離心管制造廠
超濾離心管適用于小到大規(guī)模的實驗室操作,并可進行批量處理以提高效率,。舟山離心管排行榜
離心管,管狀試樣容器,,可帶密封蓋或壓蓋,是實驗室里面常見的一種實驗耗材,,主要是配合離心機使用,即將實驗液體裝在其中,,然后放在離心機里面離心,。進口離心管按照材料分類:塑料離心管,玻璃離心管,,鋼制離心管,,又可以分為PP、PC,、PS等,,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進行制作,。根據(jù)其大小,,又分為1.5ml、2ml,、5ml,、10ml、15ml,、50ml等,,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的,。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,,就要考慮進口的了,。另外,,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分,。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,,插蓋的只有一個總體的容量標示。舟山離心管排行榜