胎牛血清:胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)超過(guò)半個(gè)世紀(jì)了,20世紀(jì)50年代末TheodorePuck在細(xì)胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來(lái)刺激細(xì)胞生長(zhǎng),。后來(lái)人們發(fā)現(xiàn),,由于胎牛未進(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG的含量極低,,不會(huì)阻礙細(xì)胞生長(zhǎng),,而且胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的成分,如維生素,、運(yùn)輸?shù)鞍?、微量元素、生長(zhǎng)因子等,,胎牛血清生產(chǎn)的一切環(huán)節(jié)均有嚴(yán)格的質(zhì)量把控。出廠的血清無(wú)細(xì)菌,、支原體和病毒等微生物的威脅,,且內(nèi)的毒性含量低,滿(mǎn)足絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)需求,。胎牛血清FBS一般需要冷凍保存,。鹽城標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)的毒性,,內(nèi)的毒性是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分,。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí),才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)的毒性直接參與細(xì)胞凋亡,,血清中內(nèi)的毒性含量越低,,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代,;內(nèi)的毒性含量過(guò)高,,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國(guó)際上規(guī)定,,胎牛血清的級(jí)別,,應(yīng)以?xún)?nèi)的毒性水平的高低來(lái)確定,其中,,特級(jí)胎牛血清的內(nèi)的毒性應(yīng)<10EU/ml,。二、血紅蛋白含量,,胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色,、淡黃色、橘紅色,、微紅色等,。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,,數(shù)值越高,;反之,數(shù)值越低,。實(shí)際上,,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響。這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,,良好的操作能降低血清的溶血,。莆田不含外泌體胎牛血清哪里有賣(mài)胎牛血清的蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v),。
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,,活性炭可以與親脂性分子結(jié)合,因此已用于從FBS中去除Hormone,,例如雄雌二醇,、孕酮、皮質(zhì)醇,、睪酮,、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質(zhì)Hormone傾向于干擾免疫測(cè)定系統(tǒng)和胰島素測(cè)定方法,。2.透析,,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子,。這包括極性和非極性分子。去除細(xì)胞因子,、葡萄糖,、氨基酸和許多其他物質(zhì)。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子,。
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術(shù)指標(biāo),,1、內(nèi)的毒性,,標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml,。內(nèi)的毒性是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況,。目前,,國(guó)產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高,,只要求不高于50EU/ml,,高出我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)10倍??梢?jiàn),,內(nèi)的毒性含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量極高,,預(yù)示著已經(jīng)污染,。2、總蛋白含量,,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,,數(shù)值偏高,說(shuō)明牛齡偏大,,不是胎牛,,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了,。人和動(dòng)物的血清常用以進(jìn)行各種血清學(xué)試驗(yàn),,幫助診斷疾病。
胎牛血清融化方法:只要2.5個(gè)小時(shí),,溫和有效地加快了水融化的速度,,另一方面,融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率,。血清融化過(guò)程中,,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,,融化過(guò)程中較大限度地保留因子的活性,,就變得非常重要?;貞浺幌?,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢,?快融!血清同樣如此,!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),,4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入),。解凍血清時(shí),,請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。莆田不含外泌體胎牛血清哪里有賣(mài)
胎牛血清是通過(guò)母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采的血獲得的新鮮胎牛全血。鹽城標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清的功能:胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能,。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的Hormone,,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,。2.提供結(jié)合蛋白,,能識(shí)別維生素、脂類(lèi),、金屬和其他Hormone等,,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,,起到釋放毒性作用,。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。5.起酸堿度緩沖液作用,。6.提供蛋白酶抑制劑,,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害,。鹽城標(biāo)準(zhǔn)血清
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