多聚酶鏈反應:多聚酶鏈反應(polymerasechainreaction,,PCR)又稱體外核酸擴增技術,,即對特定DNA的片段進行非細胞依賴性擴增,其基本過程是將已提取的待測DNA在一對寡核苷酸引物,、三磷酸核苷及耐熱DNA多聚酶存在的情況下,,分別于90℃、55℃和72℃下經(jīng)變性,、退火和核苷酸鏈的延伸,,如此循環(huán)數(shù)十次以擴增DNA。擴增物經(jīng)溴乙錠染色后作凝膠電泳,,再于紫外燈下觀察特定堿基對數(shù)的DNA的片段,,以出現(xiàn)橙紅色的電泳帶為陽性。若需進一步鑒定,,可將凝膠分離的DNA回收再用特異性探針進行雜交分析,。PCR在免疫學中通常應用于ai基因、凋亡相關基因的表達,、HLA的定型與基因分析,、免疫球蛋白和T細胞受體多樣性研究以及細胞因子、粘附分子的檢測,。PCR的方法有30余種,,如多重PCR,、巢式PCR、二次PCR,、共享引物PCR,、逆轉(zhuǎn)錄PCR、錨定PCR等等?,F(xiàn)臨床研究蕞常用的是逆轉(zhuǎn)錄PCR,,現(xiàn)簡介如下:首先提取細胞總RNA,然后在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,,以mRNA為模板合成cDNA,,隨后加入特異性引物進行擴增,再經(jīng)瓊脂糖電泳檢測特異性的DNA,,從而反映出某種基因的轉(zhuǎn)錄狀況,。蘇州含光微納科技有限公司的微流控產(chǎn)品經(jīng)過精密加工,能夠提供精確的流體控制和穩(wěn)定的實驗環(huán)境,。湖南診斷方式微流控產(chǎn)品質(zhì)量
含光蘇州納米城生產(chǎn)基地擁有730平10萬級潔凈設施及擁有設備車間,,太倉生產(chǎn)基地5000平生產(chǎn)車間,日產(chǎn)能超過百萬片,??蛻暨x擇材料,如PPPC/COC/COPPMMA/PS等,,并考慮尺寸與設備的功能,、生產(chǎn)和包裝的巧妙、制造過程的魯棒性和成本,。提出針對時間和環(huán)境的,。各種解決方案,與客戶共同完成產(chǎn)品優(yōu)化,,達到經(jīng)濟高效的生產(chǎn),。含光團隊提供相關設計文件、協(xié)助客戶完成醫(yī)療或IVD產(chǎn)品注冊,。如果對微流控芯片有相關的需求,,歡迎致電含光微納科技。 天津國產(chǎn)微流控產(chǎn)品研發(fā)微流控產(chǎn)品的設計經(jīng)過精心優(yōu)化,,能夠較大程度地減少流體浪費,,提高實驗效率。
含光微流控產(chǎn)品的驅(qū)動方式:表面張力驅(qū)動通過微通道或者微結構的表面張力(毛細力),,實現(xiàn)液體的流動和控制,,由于無需任何外力,也被稱為"自驅(qū)動",。多樣的結構尺寸變化可以實現(xiàn)液體表面張力自驅(qū)輸運的可控調(diào)制,,通過大范圍的驅(qū)動力調(diào)制,,可以提升張力自驅(qū)輸運的性能,實現(xiàn)控制流速和停留時間等,。如雅培的Triage,。線性驅(qū)動通過機械力(如活塞)完成液體的移動,一般為線性的單維度的位移,。反應試劑存儲在膠囊或儲液池中,,通過機械力(如按壓)打破儲液池物理間隔或者實現(xiàn)不同液體的移動與混合。如雅培的i-Stat,。
微流控驅(qū)動方式之聲表面波驅(qū)動:表面聲波:聲波誘導固液界面的液流,,導致液滴的移動。
Surface acoustic waves 表面聲波特點:暴露在空氣環(huán)境中的液滴放置在疏水表面上,,微流體操作單元主要由聲波控制的運動模塊組成通過聲吶實現(xiàn),,液滴的形成、運輸和混合大多是可以自由編程的
原理:作為電濕潤的替代方法,,使用振幅為納米級別的聲波聲波由置入電極中的壓電轉(zhuǎn)換芯片例如石英形成芯片疏水面的液滴可以在聲波的影響下運動
操作單元測量:由疏水面的測量點完成,,液滴經(jīng)過測量點時一部分液體被留在測量點中進行測量混合:是SAW平臺的內(nèi)在操作單元在聲波的影響下液體內(nèi)部一直在發(fā)生循環(huán)進而混合
Surfaceacousticwaves表面聲波應用PCR:由SAW、加熱裝置組成的PCR儀用于200nL的液滴中的DNR的PCR,,為防止液滴的蒸發(fā),,在液滴表面覆一層不相溶的油滴,測量DNA的敏感性達到0.1ng
優(yōu)點:能夠自由的操作小的液滴更靈活,,控制速度可根據(jù)液滴的表面張力調(diào)節(jié)
缺點:電極位置固定,,可程控性差長期的穩(wěn)定性差芯片界面制作難,,費用高 含光微納的微流控產(chǎn)品具有優(yōu)良的穩(wěn)定性,,能夠長時間保持高精度的實驗結果。
壓力驅(qū)動層流裝置特點:通過壓力梯度在微管道中形成穩(wěn)定的層流,;通過外部或者內(nèi)部的壓力源實現(xiàn),,例如通過針管、泵或者微泵,,氣體擴張原理等,。樣品和試劑以脈沖或者連續(xù)的方式進入反應體系。
原理:在不同的流速和管道維度中維持穩(wěn)定的嚴格的層流
可預測的流速
可控的混合方式
可控的分期安排
蕞早的例子是流體動力聚焦,,在流式細胞儀中以連續(xù)的方式排列細胞進行分析和分類
操作單元:基本的單元是至少兩種液體交匯的地方,,實現(xiàn)可控的混合也可以用于微粒或者細胞的聚焦,,聚焦功能需要一個中心流體和兩邊對稱的管道實現(xiàn),,調(diào)節(jié)兩邊液體的流速可以調(diào)節(jié)兩邊液體的寬度,調(diào)節(jié)中間液體的位置也可以用于分離細胞或者微粒,,可以利用磁力,、聲波或者電,、流體動力學性質(zhì)等分離微瓣膜 含光微納的微流控產(chǎn)品具有優(yōu)異的性能指標,能夠滿足客戶對實驗結果的精確要求,。陜西國產(chǎn)微流控產(chǎn)品哪家好
微流控技術的應用可以實現(xiàn)高通量實驗,,加快科研進程,提高研究效率,。湖南診斷方式微流控產(chǎn)品質(zhì)量
抗原與抗體的制備
抗體的制備
單克隆抗體和多克隆抗體:單克隆抗體(McAb)用雜交瘤技術制備(詳見第三章),,其特點:特異性好,親和力高,,只識別一個表位,。多克隆抗體(polyclonal antibodies)存在于免疫動物的血清中,可通過直接分離血清獲得,,主要應用于免疫學診斷,。也可經(jīng)中性鹽析和層析法進一步提出單一類別的免疫球蛋白(多為IgG),使診斷及各種研究在更精確的水平上進行,。優(yōu)點:可識別多個表位,,缺點:特異性差,易出現(xiàn)交叉反應,,親和力低,,通過其他抗原的吸收可獲得針對單個抗原決定簇的單價因子血清。嵌合抗體和噬菌體抗體等基因工程抗體制備詳見第三章,。 湖南診斷方式微流控產(chǎn)品質(zhì)量