病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構(gòu)成。病毒保存液包括Hank's液基礎(chǔ)、慶大霉素,、,、BSA (V),、冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑和氨基酸,。在Hank's基礎(chǔ)之上,,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩(wěn)定成分,,可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽(yáng)性率,。
病毒保存液的質(zhì)量,,是提高PCR檢測(cè)陽(yáng)性率與病毒分離陽(yáng)性率的關(guān)鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質(zhì)量,。添加常溫穩(wěn)定的類,,可解決采樣后的霉菌污染問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)采樣液的常溫保存,。 我們?cè)诓《静蓸雍蟛⒉皇嵌寄茉跇颖静杉庍M(jìn)行運(yùn)輸和保存的因此我們就需要對(duì)采集的病毒拭子進(jìn)行運(yùn)輸和保留,。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
一次性使用病毒采樣管(滅活型)的特點(diǎn):
①,、操作使用簡(jiǎn)單,無(wú)需配液,,體系內(nèi)含有高效病毒裂解液,,采樣后即刻滅活病毒,有效防止二次風(fēng)險(xiǎn),,保障運(yùn)輸及檢測(cè)人員安全
②,、病毒DNA/RNA可在常溫保存與運(yùn)輸1周不降解,按大多數(shù)商業(yè)化試劑盒進(jìn)行提取后,,獲得的DNA或者是RNA質(zhì)量好,,得率高,可完成各種基因檢測(cè)及分析實(shí)驗(yàn),,如PCR或者是qPCR等,,同時(shí)節(jié)省運(yùn)輸成本
③、內(nèi)含核酸RNA酶抑制劑,,很大程度保護(hù)病毒核酸穩(wěn)定不被降解,,大幅提高核酸提取效率。適用于,、流感病毒,、手足口病毒等常見(jiàn)的病毒樣本采集保存運(yùn)輸工作,可采集咽拭子,、鼻拭子或特定部位組織樣本,,儲(chǔ)存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或者純化等臨床試驗(yàn)。 血液保存液品牌企業(yè)對(duì)于不同的檢測(cè)目的,,需要使用不同的病毒保存液,,以及不同的病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)條件所以分成了滅活型和非滅活型。
市場(chǎng)上使用的病毒保存液主要有兩種,,一種是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液,,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽,,添加了病毒生存所需的鹽類,、氨基酸、維生素,、葡萄糖以及蛋白質(zhì),,這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時(shí)溶液呈粉紅色,。保存液中添加了必須的葡萄糖,、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,,可以穩(wěn)定病毒的蛋白質(zhì)外殼,。由于保存液營(yíng)養(yǎng)成分豐富,,有利于病毒的成活但是也有利于細(xì)菌的生長(zhǎng),如果保存液中污染了細(xì)菌,,則會(huì)大量繁殖,,其代謝產(chǎn)物中的二氧化碳會(huì)使保存液pH值下降,從粉紅色變?yōu)辄S色,。因而大多數(shù)廠家都在配方中添加了抑菌劑成分,,推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素,、慶大霉素及多粘菌素B等,,不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑,,因?yàn)檫@些組分對(duì)PCR反應(yīng)有影響,。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒,可以很大程度保持樣本的原始性,,后續(xù)不僅可以用于病毒的核酸提取檢測(cè),,還能用于病毒的培養(yǎng)和分離。但是用于檢測(cè)時(shí)應(yīng)該注意的是必須滅活以后再進(jìn)行核酸提取純化,。
非滅活型的病毒采樣管:
除了滅活型的病毒保存液,,保存的病毒完整性更好,檢出率更高,,出了核酸檢測(cè)外還可以用于其他研究,。
滅活型病毒保存液則使用上更安全,操作環(huán)境要求也不用那么嚴(yán)格,,各有各的優(yōu)勢(shì),,目前研究的非滅活病毒保存液的成分主要為Hank’s液基礎(chǔ),在這個(gè)基礎(chǔ)上,,添加了氯化鉀,,氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供必須的營(yíng)養(yǎng)離子使之專一性更強(qiáng)、且保存時(shí)間更長(zhǎng),,更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌提取率,。
非滅活型的一次性病毒采樣管的特點(diǎn):
①,、低溫非凍型保存,不破壞病毒的外殼,,方便長(zhǎng)途運(yùn)輸,。
②、適用于各種拭子樣品,,包括口腔拭子,、鼻腔拭子,、咽喉拭子等。
③,、保存液中添加了氯化鉀,、氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供了必須的營(yíng)養(yǎng)離子,使病菌專一性更強(qiáng),、且保存時(shí)間更長(zhǎng),,可以更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌的提取率,。
④,、保存液中的成分可以有效防止細(xì)菌和污染。 病毒保存液主要適用于****,、手足口病毒,、流感病毒等常見(jiàn)的病毒樣本采集保存運(yùn)輸工作。
病毒采樣管是一種通用的采樣產(chǎn)品,,可以快速滅活病毒,,可以保證檢測(cè)人員的風(fēng)險(xiǎn)還避免了氣溶膠的風(fēng)險(xiǎn)。還可以用于各種病毒樣品,、衣原體樣品包括近肆虐全球的原樣品的取樣,,可以進(jìn)行2~8天的短期儲(chǔ)存和運(yùn)輸,在-70℃或液氮環(huán)境中長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。如果需要長(zhǎng)途運(yùn)輸,,建議使用冷鏈運(yùn)輸,避免采樣管的樣本錯(cuò)過(guò)了檢測(cè)的比較好時(shí)期,。
病毒采樣管用于臨床流感,、禽流感、手足口病,、麻疹,、等病毒標(biāo)本和支原體、解脲支原體,、衣原體等標(biāo)本的采集和運(yùn)輸,,可以有效的滅活病毒,避免氣溶膠的風(fēng)險(xiǎn) 從采集完樣品到開(kāi)始檢測(cè),,中間可能遇到各種問(wèn)題,,比如異地運(yùn)輸或郵寄標(biāo)本。深圳衣原體保存液
病毒保存液是一種采樣管內(nèi)浸沒(méi)采樣拭子病毒標(biāo)本的一種保護(hù)病毒的被檢測(cè)物質(zhì)的液體,。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
滅活型病毒保存液的原理:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,,里面添加有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測(cè)樣本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作員二次,,同時(shí)又含有Rnase酶抑制劑,,能保護(hù)病毒核酸不被降解,后續(xù)的實(shí)驗(yàn)只要能檢測(cè)出病毒的核酸即可以做出診斷,。而且能在常溫下保存相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間,,節(jié)省了病毒樣品保存以及運(yùn)輸?shù)某杀尽?
非滅活型病毒保存液的原理:
它同時(shí)保留了病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者RNA,這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過(guò)程中的完整性,,雖然操作失誤時(shí)會(huì)也有一定的性風(fēng)險(xiǎn),,但是這種保存液很大程度地保持了病毒樣本的原始性,是一種培養(yǎng)型的病毒運(yùn)輸介質(zhì),,需要注意的是采樣后長(zhǎng)時(shí)間保存需要保持嚴(yán)格低溫保存,。
深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
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