抗體是一種重要的生物分子,,在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用,。以下是抗體的一些主要用途:科學(xué)研究:抗體在科學(xué)研究中也發(fā)揮著重要的作用,如Western Blot,、免疫組化,、原位雜交等實(shí)驗(yàn)方法中都需要使用抗體??贵w可以用于研究細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、基因表達(dá)、蛋白質(zhì)相互作用等問題,,為揭示生命活動(dòng)的奧秘提供重要的工具,。疫苗研發(fā):抗體可以用于疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)過程中。在疫苗研發(fā)中,,通過制備針對特定病原體或病毒的抗體,,可以了解病原體或病毒的結(jié)構(gòu)和功能,為疫苗的設(shè)計(jì)和優(yōu)化提供重要信息,。在疫苗生產(chǎn)中,,抗體的制備和檢測也是重要的環(huán)節(jié)之一??贵w可以通過中和病原體,、啟動(dòng)免疫細(xì)胞和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)等方式發(fā)揮作用。江蘇新基因PRR11抗體基因
抗體主要功能:中和有害素和阻止病原體入侵,。識別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),,其中CDR部位在識別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用,。抗體有單體,、二聚體和五聚體,,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同,。抗體結(jié)合抗原表位的個(gè)數(shù)稱為抗原結(jié)合價(jià),。Ig單體可結(jié)合2個(gè)抗原表位,,為雙價(jià)。SIgA是二聚體,,可結(jié)合4個(gè)抗原表位,,為4價(jià)。IgM是五聚體,,理論上可以結(jié)合10個(gè)抗原,,應(yīng)該是10價(jià),但由于立體構(gòu)象的空間位阻,,使IgM一般只能結(jié)合5個(gè)抗原表位,,故為5價(jià)。蘇州IgG抗體費(fèi)用抗體在嬰兒期主要來自于母體傳遞,,隨著年齡的增長,,嬰兒自身的抗體產(chǎn)生能力逐漸增強(qiáng)。
抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的,,由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,,由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體,;除了抗原決定簇的多樣性以外,,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG,、IgM,、IgA、IgE和IgD等五類抗體,??乖碳C(jī)體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),,由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體,。
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,,分裝小瓶,,置-20℃以下的低溫保存,,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價(jià)無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融,。也可將抗血清冷凍干燥后保存,。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:1、制備抗原,。2,、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。3,、動(dòng)物免疫,。4、試取血進(jìn)行測試,,看看是否成功免疫,。5、如果成功免疫,,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,,采集全部血清。6,、純化出抗體,。7、鑒定抗體,。包括純度以及特異性,。具體操作與制備原理參見中國免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)網(wǎng)??贵w的作用不僅限于中和病原體,,還可以啟動(dòng)其他免疫細(xì)胞,如巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞,,促進(jìn)病原體的去除,。
多克隆抗體佐劑應(yīng)用:1.佐劑的類型 實(shí)踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬,、弗氏佐劑,、脂質(zhì)體和石蠟油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌,、白喉?xiàng)U菌以及細(xì)小棒狀桿菌等,。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份,;混合,,高壓滅菌后保存。用時(shí)加熱融化,,冷卻至 50℃左右,,加抗原進(jìn)行乳化處理,。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA),;弗氏不完全佐劑 10ml,;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。初次免疫時(shí),,建議用弗氏完全佐劑,,以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫反應(yīng)。再次免疫時(shí),,一般不用完全佐劑,,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時(shí),,一般不用弗氏完全佐劑,,以免卡介苗的干擾。特定的抗體可以用于診斷某些疾病,,如用于檢測乙肝病毒傳染的抗體,。深圳異種抗體
抗體工程可以通過改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。江蘇新基因PRR11抗體基因
多克隆抗體特異性鑒定:抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力,??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示,。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,,即該血清的特異性較好,。江蘇新基因PRR11抗體基因