操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動下直接流 過膜,。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出,。NFF 常 用于無菌過濾,、澄清預(yù)過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時(shí)與膜表面呈一定角度,,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法,。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,,而現(xiàn)在,,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計(jì)中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便,。超濾濃縮管的各種系列應(yīng)用領(lǐng)域還是不一樣的,。嘉定區(qū)Merck超濾濃縮管代理價(jià)
特別推薦應(yīng)用(提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考) Microcon?超濾管: Microcon?PCR 級超濾管: ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀,,離心法高效濃縮基因組DNA 應(yīng)用指南 典型應(yīng)用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細(xì)胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮(抗原,,抗體,酶等) 從含有SDS(或無SDS)的緩沖液中濃縮gDNA 核酸濃縮與脫鹽(單鏈或雙鏈核酸) 去除標(biāo)記核苷酸 去除標(biāo)記氨基酸 從擴(kuò)增的DNA產(chǎn)物中去除引物 克隆前去除連接序列(linker)長寧區(qū)Merck離心濃縮管銷售上海超濾濃縮管銷售公司,。
近年來隨著分離純化技術(shù)的提高,,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進(jìn)一步吸引了越來越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對象,。研究的前提是方便,、高效、標(biāo)準(zhǔn)化地分離純化外泌小體,。經(jīng)過近20年的探索,,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法,、色譜法,、親和純化法等。在大量實(shí)踐中大家逐漸認(rèn)識到根據(jù)下游研究對樣品的要求,,以及起始樣品的規(guī)模,、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略,。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,,對操作人員也沒有特別的經(jīng)驗(yàn)要求,超濾法后來居上,,成為實(shí)驗(yàn)室中制備外泌體的通用方法,。
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻,。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min,。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL,。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮,。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制,。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化,。 用Protein A或G對抗體進(jìn)行親和純化上海超濾濃縮管哪家比較好?
這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用,,其Ultracel?超濾膜對于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合,,連同醫(yī)藥級O型圈封閉設(shè)計(jì),確保更少的樣品丟失,,更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果,。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),,即使是小體積,、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡便快捷,易于標(biāo)準(zhǔn)化,。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA,。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì),醫(yī)用級O型圈密封,,保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少,。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使樣品量很小也能獲得理想的得率,,濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X,。益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。閔行區(qū)超濾濃縮管哪家優(yōu)惠
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加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心,。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min,。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管,。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min,;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min,。回收管中即純化好的蛋白,。 6. 如果是純化抗體,,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),,可以延長結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可,。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請使用目錄號ACS500024,。嘉定區(qū)Merck超濾濃縮管代理價(jià)