.53+0.03,;1.09+0.03,、1.51+0.05,;1.37士0.03、1.43+0.03,;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機(jī)營養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL,;M: 1kb plus DNA ladder,,Lane 1-4:自動化提取,;Lane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機(jī)營養(yǎng)土,;Lane 2&6: 100mg花壇土,;Lane 3&7: 250mg鹽堿土,;Lane 4&8: 250mg沙漠土,。提取不同類型土壤DNA進(jìn)行PCR及酶切結(jié)果,。M: 1kb plus DNA ladder,;Lane 1:有機(jī)營養(yǎng)土,;Lane 2:花壇土,;Lane 3:鹽堿土,;Lane 4土壤DNA提取的直銷公司。青浦區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取代理商
所述pH緩沖劑為Tris-HCl、Tris-醋酸,、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4,、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,,所述pH緩沖劑的pH值為7.0-11,,推薦的pH緩沖劑為Tris-HCl,推薦的pH緩沖劑的pH值為7.5-8.5,; (b)結(jié)合液,,其組成成分包括表面活性劑、離液鹽,、pH緩沖劑,; 所述表面活性劑為:聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20,、TWEEN 40、TWEEN 60,、TWEEN 80,、NP 40中的一種或兩種及以上的混合,,所述表面活性劑的質(zhì)量濃度為1-100g/L,; 所述離液鹽為異硫氰酸胍、鹽酸胍,、硫氰酸鉀,、高氯酸鈉、碘化鉀,、碘化鈉中的一種或兩種及以上的混合,所述離液鹽的濃度為3-5 mol/L,; 所述pH緩沖劑為Tris-HCl、Tris-醋酸,、NaH2PO4-Na2HPO4,、KH2PO4-K2HPO4,、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,,所述pH緩沖劑的pH值為4.5-7.0,;上海土壤DNA提取土壤DNA提取咨詢問價上海關(guān)于土壤DNA提取的哪家靠譜,?
取純度,。絕招四:***的硅膠柱膜及配套耗材,能特異性高效吸附核酸,,比較大限度截留DNA分子,,且柱容積大,,可以減少結(jié)合時離心的次數(shù),。四大絕招傍身,,各種類型土壤的樣本統(tǒng)統(tǒng)搞定,,再讓我們看看TA在江湖上的表現(xiàn)吧,。2.好不好用,,數(shù)據(jù)來說話,。1.提取不同類型土壤基因組DNA收率及純度結(jié)果,。含高腐殖酸有機(jī)營養(yǎng)土,、水稻土,、花壇土、鹽堿土,、沙漠土等土壤樣本,,DNA提取收率及純度結(jié)果如下表:Sample Type:Organic soil,、Paddy soil,、Flower
8000rpm離心1分鐘,,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix,、2 μl primer set、4 μl模板,,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,,11分鐘;94℃,,20 秒,,59℃,3分鐘,,30個循環(huán),;60℃,10分鐘,;4℃保存,;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,,1 μl PCR產(chǎn)物,,9 μl甲酰胺,,其中已加Liz。 實(shí)施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,,烘干,,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,,震蕩混勻后,,75℃加熱裂解15分鐘,;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,,加入800 ul結(jié)合液,混勻,;混合液轉(zhuǎn)移至裝有硅膠膜的離心柱中,,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,,加入500 ul漂洗液,,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,,加入500 ul漂洗液,,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,,12000rpm離心3分鐘,,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘,;加入20 ul洗脫液,,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,,丟棄離心柱,,離心管中液體即為DNA溶液。 2)高質(zhì)量的土壤DNA提取,,保證您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
實(shí)驗(yàn)的時候,有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況,,提取DNA的純度過低,、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題,,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,,希望可以幫到大家,,在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1:土壤樣品含水量過高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過濕,,可先將樣本10,,000 x g,離心30s,,盡可能多的去除液體。問題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦,?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】買土壤DNA提取就找益啟生物,。青浦區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取代理商
上海益啟生物公司是有授權(quán)的土壤DNA提取公司嗎?青浦區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取代理商
加入500 ul漂洗液,,混勻,,上磁力架吸附1分鐘,,吸棄上清,;70℃加熱3分鐘,;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,,70℃加熱3分鐘,;上磁力架吸附1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix,、2 μl primer set,、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,,11分鐘,;94℃,20 秒,,59℃,,3分鐘,30個循環(huán),;60℃,,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行,;電泳上樣體系為,,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,,其中已加Liz,。 以上所述*為本發(fā)明的具體實(shí)施方式而已,并不用于限制本發(fā)明,,對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說,,本發(fā)明可以有各種更改和變化;凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改,、等同替換,、改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi),。青浦區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取代理商