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松江區(qū)培養(yǎng)小室細胞培養(yǎng)參數(shù)

來源: 發(fā)布時間:2025-04-08

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每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值,,直到達到平臺,提示細胞已經(jīng)形成致密單層,;或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率,,以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞,,可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用,。細胞單層匯合后,用DPBS清洗一次細胞,,加入含有不同濃度藥物(一般10-200μM)的緩沖液,。如果要測藥物從上至下的運輸效果,則上層小室中加藥物,,下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液,;反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)(60rpm震蕩或者不震蕩)1-2h,,到達時間之后,,分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液(一般50μL )轉移至新的轉運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物,,分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,,通過多孔閃爍讀板儀讀值。

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