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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-04

實(shí)施例1 以二氧化硅納米顆粒提取土壤尿液DNA。 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,,烘干,,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘,;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,,混勻,;混合液轉(zhuǎn)移至裝有15 ul二氧化硅納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘,;8000rpm離心1分鐘去除上清液,;加入500 ul漂洗液,混勻,,8000rpm離心1分鐘去除上清液,;加入500 ul漂洗液,混勻,,8000rpm離心1分鐘去除上清液,;70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,,70℃加熱3分鐘,;上海益啟生物的聯(lián)系電話。閔行區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取一級(jí)代理

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通常被稱(chēng)為內(nèi)生菌(endophyte),。植物內(nèi)生菌對(duì)植物病蟲(chóng)害防治,、農(nóng)作物增產(chǎn)、提高藥用植物品質(zhì)和藥效,、維護(hù)生態(tài)系統(tǒng)平衡等諸多方面具有重要意義,,同時(shí)可以作為潛在的生防載體菌而加以利用。從藻類(lèi),、蕨類(lèi),,到木本,、藤本的維管束植物,,幾乎所有類(lèi)群的植物體內(nèi)都含有內(nèi)生菌。主要包括內(nèi)生細(xì)菌,、內(nèi)生***,、內(nèi)生放線菌。其中***占絕大多數(shù),、而細(xì)菌中有三分之二是革蘭氏陰性菌,。如何獲得植物內(nèi)生菌DNA?植物內(nèi)生菌DNA的提取有著2大難點(diǎn):1,。崇明區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取土壤DNA提取的直銷(xiāo)公司,。

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘,; b.最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,,混勻,; c.將上一步的混合液轉(zhuǎn)移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料,; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料,; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴(kuò)增及電泳 將上步純化的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,,在電泳儀中檢測(cè)DNA,。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結(jié)合液,、漂洗液,、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,,在加入結(jié)合液之前,,樣品土壤來(lái)源的二氧化硅不與DNA結(jié)合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,,上清液中加入結(jié)合液,,混合后轉(zhuǎn)入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,,漂洗硅基DNA吸附材料,,洗脫獲得純化DNA;

取100-200 mg土壤樣品,,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,,75℃加熱裂解15分鐘,;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,,加入800 ul結(jié)合液,,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,,70℃加熱3分鐘,;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,,離心管中液體即為DNA溶液,。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set,、4 μl模板,,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘,;上海益啟生物的土壤DNA提取詢(xún)價(jià)聯(lián)系方式,。

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:沙漠土;Lane 5:陰性對(duì)照,。圖:提取不同土壤基因組DNA PCR擴(kuò)增結(jié)果,。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1/3/5/7: 酶切前,;Lane 2/4/6/8: 酶切后,;Lane 1&2:有機(jī)營(yíng)養(yǎng)士;Lane 3&4:花壇土,;Lane 5&6:鹽堿土,;Lane 78&8:沙漠土。圖:提取不同土壤基因組DNA用Apa I酶切結(jié)果,。PART.03,。選擇MP試劑盒的理由,。MagBeads FastDNATM Kit for Soil:A260/A280更接近1.8, A260/A230更高, 提取純度高于平均水平,,提取效果穩(wěn)定。DNA收率效果對(duì)比—濃度更高質(zhì)量有保障的土壤DNA提取在哪里買(mǎi)您知道嗎,?奉賢區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取代理商

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物,微生物殘?bào)w腐解產(chǎn)生的有機(jī)質(zhì),、土壤生物(固相物質(zhì))以及水分(液相物質(zhì)),、空氣(氣相物質(zhì))及氧化的腐殖質(zhì)等組成。2011-2018:地球微生物組計(jì),。200,000 samples, 500,000 MAGs,amplicon sequencing, metagenomics,and metabolomics. Pis: Jack A. Gilbert,Rob Knight andJanet K. Jansson,。目前從土壤樣品中提取微生物DNA的方法主要有溶液抽提法、玻璃奶法,、柱膜法和磁珠法,。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的突破和生物信息學(xué)的發(fā)展,自2012年以來(lái)土壤微閔行區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取一級(jí)代理