(c)漂洗液,,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0,; (e)硅基DNA吸附材料,,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜,、玻璃纖維膜,、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種,。 使用本發(fā)明的試劑盒,,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,,離心分離土壤和上清液,,上清液加入結(jié)合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,,分離硅基DNA吸附材料和液體,,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA,;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,,烘干,土壤DNA提取的報(bào)價(jià)具體是多少呢?崇明區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取一級(jí)代理
8000rpm離心1分鐘,,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix,、2 μl primer set,、4 μl模板,,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘,;94℃,,20 秒,59℃,,3分鐘,,30個(gè)循環(huán);60℃,,10分鐘,;4℃保存,;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行,;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,,9 μl甲酰胺,,其中已加Liz。 實(shí)施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,,烘干,,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘,;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,,混勻,;混合液轉(zhuǎn)移至裝有硅膠膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘,;倒棄收集管中廢液,,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,,70℃加熱3分鐘,;加入20 ul洗脫液,,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,,丟棄離心柱,,離心管中液體即為DNA溶液。 2)徐匯區(qū)土壤微生物土壤DNA提取聯(lián)系人高質(zhì)量的土壤DNA提取,,保證您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘,; b.最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,,混勻,; c.將上一步的混合液轉(zhuǎn)移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料,; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料,; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴(kuò)增及電泳 將上步純化的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,,在電泳儀中檢測(cè)DNA,。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液,、結(jié)合液,、漂洗液、洗脫液,,利用特殊成分的土壤裂解液,,在加入結(jié)合液之前,樣品土壤來源的二氧化硅不與DNA結(jié)合,,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,,上清液中加入結(jié)合液,混合后轉(zhuǎn)入含有硅基DNA吸附材料中,,分離液體和硅基DNA吸附材料,,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA,;
微生物,,而獲得高濃度、大片段,、多樣性程度高的土壤微生物總DNA是研究土壤微生物的基礎(chǔ),。FastDNATM SPIN土壤試劑盒,。我們公司獨(dú)特設(shè)計(jì)的FastDNATM SPIN土壤試劑盒可從土壤、淤泥等復(fù)雜環(huán)境樣本中高效提取全部微生物的總DNA,。多達(dá)500mg的樣本加入到裂解介質(zhì)E管中,,再配合我公司生產(chǎn)的FastPrepTM-24 5G儀器,可以裂解多種疑難樣本,,例如***孢子,、內(nèi)生孢子、革蘭氏陰性菌和酵母等,,釋放出來的DNA經(jīng)過硅膠基質(zhì)離心純化,,可直接用于PCR等下益啟生物是土壤DNA提取的代理商。
NA基因擴(kuò)增子測(cè)序及分析,,研究菌群分布,。參考文獻(xiàn)2:·樣本類型:***種子?!颖痉鬯椋好抗?0粒種子,,電動(dòng)組織研磨器配合研磨杵,,研磨5min,。·樣本DNA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取,。·下游實(shí)驗(yàn):細(xì)菌16S rDNA基因擴(kuò)增子測(cè)序及分析,,研究菌群分布,。 相關(guān)文獻(xiàn):1.Campisano A ,Antonielli L ,, Pancher M ,, et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014,, 9.2.Chen X ,, Krug L ,Yang H ,, et a益啟生物公司帶您了解土壤DNA提取詳情,。浙江土壤基因組土壤DNA提取訂購(gòu)
上海益啟,采購(gòu)?fù)寥繢NA提取的放心之選,。崇明區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取一級(jí)代理
保證提取濃度高,;純:獨(dú)特的抑制物去除技術(shù), 提高A260/230,, 保障提取純度好,, 提取的DNA可直接應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn),;多:完美配合自動(dòng)化核酸提取儀,實(shí)現(xiàn)高通量提??;廣:多種環(huán)境土壤均能有效提取,適用性廣,,與大多數(shù)核酸自動(dòng)化提取儀和工作站相匹配,;安:不使用酚、氯仿等有毒試劑,,安全環(huán)保,;【知識(shí)點(diǎn)】這些土壤基因組DNA提取問題,你遇到過嗎,?【知識(shí)點(diǎn)】這些土壤基因組DNA提取問題,,你遇到過嗎?問題匯總 | **試用 | 反饋有獎(jiǎng),。大家在做崇明區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取一級(jí)代理