每隔2天用電阻儀測量細(xì)胞跨膜電阻值，直到達(dá)到平臺,，提示細(xì)胞已經(jīng)形成致密單層,；或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率，以判斷細(xì)胞剛好完全匯合,。電阻儀測量因不傷害細(xì)胞,，可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用,。細(xì)胞單層匯合后，用DPBS清洗一次細(xì)胞,，加入含有不同濃度藥物（一般10-200μM）的緩沖液,。如果要測藥物從上至下的運輸效果，則上層小室中加藥物,，下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液,；反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)（60rpm震蕩或者不震蕩）1-2h,，到達(dá)時間之后,，分別從細(xì)胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液（一般50μL ）轉(zhuǎn)移至新的轉(zhuǎn)運分析板進(jìn)行LC/MC分析。對于放射性標(biāo)記藥物,，分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,，通過多孔閃爍讀板儀讀值。哪家Transwell小室是有正規(guī)授權(quán)的,？靜安區(qū)添加劑細(xì)胞培養(yǎng)哪家好

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實驗簡介： 藥物研究包括吸收,、分配,、代謝、排泄和毒性等多個方面,，而吸收是第一步,。這個實驗在以內(nèi)皮細(xì)胞通透性,、藥物滲透等為研究方向的課題中很常用。 常見檢測細(xì)胞： 人結(jié)腸腺*細(xì)胞系 Caco-2,、HT-29,、Lovo、SW-480,，人結(jié)腸上皮細(xì)胞 T84,，狗腎上皮細(xì)胞系 MDCK，豬腎上皮細(xì)胞系LLC/PK1 等,，主要模型為上皮細(xì)胞吸收,、血腦屏障。 具體操作： 上皮細(xì)胞生長到細(xì)胞匯合度達(dá)80-90%時開始實驗,，不要超過90%,，否則會影響到后續(xù)細(xì)胞單層的形成。將細(xì)胞均勻接種在小室膜上,。對于24孔板和96孔板的接種密度見本文圖示,。

Dura pore （聚偏二氟乙烯） ?培養(yǎng)基 ?蛋白質(zhì)吸附率比較低 ?酒精純化的色譜洗脫液 ?添加劑的除菌過濾 MF-Millipore MCE (混合纖維素) ?水 ?使用**早、**為***,，較為 ?鴛理棗 經(jīng)濟(jì)的濾膜 ?亜惑— ?去除痕里蛋白＞5染 Nylon （尼龍） ?較***的化學(xué)兼容性 ?溶劑過濾 無困過濾產(chǎn)品選擇指南 用于細(xì)胞培養(yǎng)基制備和小體積樣品過濾的針頭式濾器（~200mL） 描述 孔徑（pm） 膜 處理體積 Millex?針頭式過濾器 (4, 13, 25 mm) 0.2 0.22 0.45 0.5 Millipore Express? PLUS (PES),Dura pore? (PVDF), MCE 1 - 100 mL Millex?針頭式濾器 無菌Millex?針頭式過濾器特別適合小體積樣品, 例如***或添加劑的過濾,，使用極為方便。 Millex?以其綜合***品質(zhì)和穩(wěn)定的質(zhì)量長久以來 作為行業(yè)金標(biāo)被研究者***采用和信賴,，成為無 菌過濾環(huán)節(jié)的優(yōu)先產(chǎn)品,。上海益啟生物的酶詢價公司電話。

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