總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),,低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S),。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,,28S的位置大約在2kb,,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大,。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上,。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年,。RNA半衰期比較短,,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實驗,,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,,NorthernBlot等。rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場所,。杭州正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,,如果要提高核酸得率,,也可通過增加樣本量來實現(xiàn)。一般先取一根拭子的涮洗液樣本,,然后進(jìn)行提取,,如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果,,應(yīng)及時考慮更換試劑盒,。目前國內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q、Biog等,。根據(jù)我們的經(jīng)驗,,Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次)在0.5-3.5ug,。同樣處理的口咽拭子,Biog試劑盒的提取得率在1-4ug,,基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實驗的要求北京RNA提取試劑廠家批發(fā)價RNA定量方法與DNA定量相似,。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu),,但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同,,不過除了A-U,、G-C配對外,G-U也可以配對,。在細(xì)胞中,,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,,即tRNA(轉(zhuǎn)運RNA),,rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA),。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者,;rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場所。
病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血,、血清,、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA,。在此試劑盒中,,使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀,,同時也可以減少RNA的降解,。本試劑盒操作簡捷方便。30-40min就可以完成一個樣品的提取,,得到純凈的RNA,。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯,和分子克隆等實驗,。此外,,裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個很好的保存液。儲存在裂解液中的病毒RNA(在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品)可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個月,;在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時,,儲存在裂解液中的樣品在運輸過程中,,也可以在4℃穩(wěn)定一日,;-20℃穩(wěn)定一周,。總RNA提取試劑:自備新開封或?qū)iT氯仿,,異丙醇,,75%乙醇,DEPC處理水,。
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清,、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA,。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA,、檸檬酸鈉,、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實驗操作,。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,可以從普通植物的根、莖,、葉中快速提取總RNA,,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,,適用于RT-PCR、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實驗??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,,提取效率高。高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),,提取RNA的純度高,產(chǎn)量大好的試劑盒價格比較貴,,在實驗室可以根據(jù)自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用,。RNA提取試劑直銷廠家
根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開,。杭州正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
RNA提取試劑注意事項:1、需自備氯仿,,異丙醇,,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),,和DEPC水,。2、所有離心管,,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染,。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,,然后滅菌,,烘干。溶液需用DEPC水配制,。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,,處理過夜,滅菌即成DEPC水,。3,、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因為在細(xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品,。如果不能及時抽提RNA,,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存,。杭州正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹