鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,,使細胞在三維環(huán)境中生長。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,,檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長,、PC-12細胞在三維膠表面正常生長,。使用方法:1,、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導,。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,West...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮,、豬皮、牛腱中提取,,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質,也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,;同時,,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒,如果用此開發(fā)醫(yī)用產品更加存在著品質的不穩(wěn)定及潛在的風險及危害,?!敝链耍氡亍昂淖游仓痹谥R產權界的名聲又亮了一些,。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,。無錫北京鼠尾膠原鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前,,臨床上常用的有人工骨移植,、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,,...
鼠尾膠原實驗應用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結構,,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率.結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm,;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開,;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接,;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的,;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮,、豬皮,、牛腱中提取,,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質,,也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型;同時,,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒,,如果用此開發(fā)醫(yī)用產品更加存在著品質的不穩(wěn)定及潛在的風險及危害,。”至此,,想必“耗子尾汁”在知識產權界的名聲又亮了一些,。一種基于鼠尾膠原蛋白:根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料。金華正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,為鼠尾膠原蛋白,、...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞,。也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長,。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。1mg/ml濃度以上,,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,,檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長、PC-12細胞在三維膠表面正常生長,。使用方法:1,、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布...
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜,。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接...
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,為鼠尾膠原蛋白,、聚乙烯醇、殼聚糖,、水制成的凍干止血材料,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為1-10%0.2-5%0.2-2%,余量為水,。2.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5%2%1%,,余量的水,。3.根據權利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾,。鼠尾膠原醋酸溶解:建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。無錫正規(guī)鼠尾膠原平均價格服用膠原蛋...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌,、預冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),,雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結)...
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,,制作過程需要經歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白,。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結構,可以用來當作細胞培養(yǎng)的基質,。細胞培養(yǎng)過程中,,細胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細胞除外)才能完成生長過程,,而有一些細胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用,。這一步也被稱作涂層(coating),,給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,,細胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細胞,,同樣也可...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細胞,以3...
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結構,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率,。結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的,。結論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體...
膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,,并側向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結構,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。制備鼠尾膠原:吸去...
膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結構的主要組成,。在人的身體中這是皮膚,、筋、軟骨,、骨骼及結締組織的較主要的蛋白質,。膠原蛋白占人體蛋白質總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據其遺傳分子結構遺傳基因的差別,,膠原蛋白分為20幾個亞型,。但較為常見的為Ι,、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質優(yōu)良。鼠尾膠原醋酸溶解:建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。寧波正規(guī)鼠尾膠原報價鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將20...
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌,、預冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中...
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,,其生物力學強度極差,,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-PAGE,,結果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質量130000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對分子質量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2,、6d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進行TEM和電子衍射觀察。從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥,。武漢鼠尾膠原進貨價...
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結構,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率,。結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的,。結論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體...
鼠尾膠原:含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),,立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值),。加入760μL的細胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性...
膠原蛋白的適用征狀:1,、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光,、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2,、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂,、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3,、由于體內異常黑色素分泌旺盛,,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時代謝出異常黑色素,,形成各種色斑,。4、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當使膚質受到損傷,,過早出現(xiàn)細紋,皮膚干燥,、脫皮、,、毛孔粗大等不良癥狀,。5、由于內分泌功能紊亂,,皮膚膚質差,、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,,易長青春痘留下的色印,、色素沉著等,。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作,,電腦輻射造成脫發(fā),內分泌紊亂問題,。取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸...
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞,,制備鼠尾膠原,,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基,、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當的比例下混合后形成凝膠構建類似物,。結果:形成的類似物中成纖維細胞生長狀態(tài)良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力,。結論:①利用鼠尾膠原可以構建類似物,,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復合皮的關鍵與基礎;②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性,,它是研究成纖維細胞與細胞外基質之間以及細胞之間相互作用的良好模型,。從包被表面除去多余的液體。過夜干燥,。廣州正規(guī)鼠尾膠原銷售廠家膠原蛋白的提取方法:1.堿法提?。簤A法提取膠原...
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,收集上清液,;在冰水浴中,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,,調節(jié)pH=6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀,。免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。青島正...
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜,。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,,可用于化妝品,,工業(yè)和食品生產等領域。上海南昌鼠尾膠原含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例)...
實驗應用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果,。結果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,,細胞角蛋白18表達陽性,免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征,。結論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉。吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克),。天津正規(guī)鼠尾膠原哪家便宜膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,,而引起纖...
膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,并側向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結構,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。氯仿的量約為膠原溶...
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實驗內容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內,。制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱,;3、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,;4、重復步驟2,、3,,直至尾腱量夠用;5,、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克);6,、將尾腱置于平皿內剪碎,,轉移至三角燒瓶中;7...
含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),,立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試),。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。一種基于鼠尾膠原...
膠原蛋白的適用征狀:1,、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光,、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2,、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂,、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象,。3、由于體內異常黑色素分泌旺盛,,大量沉積皮膚表面,,肌膚不能及時代謝出異常黑色素,形成各種色斑,。4,、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當使膚質受到損傷,過早出現(xiàn)細紋,皮膚干燥,、脫皮,、、毛孔粗大等不良癥狀,。5,、由于內分泌功能紊亂,皮膚膚質差,、皮膚發(fā)油,、發(fā)暗,易長青春痘留下的色印,、色素沉著等,。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作,,電腦輻射造成脫發(fā),內分泌紊亂問題,。從包被表面除去多余的液體,。過...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導,。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,West...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導,。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,West...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞,。也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,,檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長,、PC-12細胞在三維膠表面正常生長。使用方法:1,、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳...