HE染色常見問(wèn)題:成片的染色模糊不清,,灰染答:(1)組織未及時(shí)固定,,部分自溶,;或固定不佳,,深部組織未處理到。這種只能重新固定了,。(2)盡管乙醇也是一種固定液,,但盡量少用或不用,因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,,染色效果不好,。(3)包埋時(shí)蠟的溫度過(guò)高,,或切片后烤片時(shí)間和溫度過(guò)久過(guò)高都不好,可能會(huì)導(dǎo)致無(wú)法染色,。(4)脫蠟不徹底,;染料有問(wèn)題;分化過(guò)度導(dǎo)致的顏色變淡,,鏡下組織界限不清,;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上,。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來(lái)的水霧),。冰凍組織切片的HE染色,。山西結(jié)果客觀的HE染色檢測(cè)
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀,、可靠的方法之一,。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,在光學(xué)顯微鏡,、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,,通過(guò)觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來(lái)判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對(duì)于貼壁細(xì)胞,,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,,讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,,用4%多聚甲醛固定5min,。對(duì)于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,,離心1000r/min收集細(xì)胞,,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,,涂片或用離心甩片,,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,,貼壁細(xì)胞由原來(lái)的梭形或多角形變小,、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,,胞漿呈淡紅色,,核固縮、破碎,,形成凋亡小體等,。懸浮細(xì)胞,,整個(gè)細(xì)胞皺縮,核固縮,,破碎,,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等,。海南HE染色檢測(cè)HE染色,,優(yōu)先南京英瀚斯生物。
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存,。經(jīng)過(guò)HE染色,,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,,組織有無(wú)損傷;然后看切片有無(wú)刀痕,;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對(duì)比鮮明。
HE染色就是用蘇木精和伊紅對(duì)細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法,。H:Hematoxylin,,蘇木精E:Eosin,伊紅蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,,被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。伊紅(,,E)是一種酸染料,,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸,。染色前,,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,,***入蒸餾水,,就可染色,。 很多細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時(shí),,伊紅著色由淺變深。常規(guī)HE染色和特殊染色服務(wù),。
HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,,樣品處理:a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片:蒸餾水2分鐘,。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,,再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液,,約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒,。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí),,如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理,。石蠟組織切片的HE染色,。天津質(zhì)量好的HE染色檢測(cè)
HE染色切片知識(shí)以及如何做出漂亮的切片。山西結(jié)果客觀的HE染色檢測(cè)
HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài),、大小來(lái)區(qū)別各種細(xì)胞的,,并不是直接通過(guò)顏色來(lái)區(qū)分的,HE染色細(xì)胞壞死的三種改變:(1)細(xì)胞核的改變:這是細(xì)胞壞死的主要形態(tài)標(biāo)志,,表現(xiàn)為核濃縮,,核碎裂,核溶解,。(2)細(xì)胞質(zhì)的改變:由于胞質(zhì)發(fā)生凝固或溶解,,HE染色呈深紅色顆粒狀,如肝細(xì)胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,。(3)間質(zhì)的改變:由于各種溶解酶的作用,,基質(zhì)崩解,、膠原纖維腫脹、斷裂或液化,,與壞死的細(xì)胞融合成一片,,呈紅染的顆粒狀無(wú)結(jié)構(gòu)物質(zhì)。南京英瀚斯生物山西結(jié)果客觀的HE染色檢測(cè)
南京英瀚斯生物科技有限公司致力于醫(yī)藥健康,,是一家服務(wù)型公司,。公司業(yè)務(wù)分為實(shí)驗(yàn)外包,動(dòng)物模型構(gòu)建,,細(xì)胞分子實(shí)驗(yàn),,病理檢測(cè)等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù),。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),,遵守行業(yè)規(guī)范,,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。在社會(huì)各界的鼎力支持下,,持續(xù)創(chuàng)新,,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持,。